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模型制备

鼠急性心肌梗死模型

2020年05月29日 浏览量: 评论(0) 来源:《心血管病实验动物学》 作者:霍勇 陈明 主编 责任编辑:yjcadmin

1.实验动物  一般选用体重300g左右的雄性大鼠。

2.模型制备方法  予5%戊巴比妥钠腹腔麻醉(50mg/kg),仰卧固定于手术台上。触及大鼠心尖搏动最明显的肋间,剪开皮肤、肋间肌,挤出心脏,于肺动脉圆锥与左心耳交界处找到前降支,在距根部2mm处用丝线结扎,迅速将心脏送回胸腔,并快速挤压胸廓,直至动物回复自主呼吸,缝合胸壁肌肉及皮肤(小窍门:左冠状动脉起源于主动脉,并靠近肺动脉窦的左缘,走行于肺动脉窦和左心耳之间,呈头尾斜行走行2~3mm后开始分支,埋于心外膜下心肌中,通常看不到。因此结扎时将丝线穿于肺动脉窦,在距离肺动脉瓣2mm处从肺动脉窦与左心耳末端连线的中部穿出,约缝合5mm宽的心肌,以保证结扎住动脉。结扎的动作要快,尽量减少心脏置于胸腔外的时间)。

3.研究结果的评价

(1)心脏功能评价:经颈动脉插管,连接多导生理记录仪可以记录心率,血压,左心室内压和等容收缩期压力微分(dp/dt),多用于急性实验。部分实验室可以提供小动物专用超声仪,对心脏功能进行检测,可以保证慢性实验的需要。

(2)大体病理:可半定量评估梗死心肌的面积,常用四氮唑蓝(TTC)染色。动物处死前经静脉插管注入0.5%伊文斯蓝溶液,正常心肌染成蓝色,梗死和缺血心肌不着色。处死动物,迅速取下心脏,用滤纸吸干水分,置入-20℃冰箱冷冻20分钟后取出,将左心室部分垂直长轴切成2~3mm的横断片,浸入2%TTC溶液,置入37℃水浴反应30分钟。缺血心肌染成砖红色,梗死心肌不着色。称重每一心肌切片,并对切片照相,用图像分析系统对每一切片的颜色进行分析,用梗死区占左室总面积的百分比表示,求所有切片所得数值的加权平均。

(3)组织学:根据研究需要选择免疫组化、免疫荧光等方法检测目标物质。


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