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研究人员为小鼠品系提供了强大的遗传工具以鉴定表达P2X2的细胞

2020年08月11日 浏览量: 评论(0) 来源:生物帮 作者: 责任编辑:admin
摘要:本文举例说明了如何用更好的技术重新审视问题会导致人们更加清楚地理解问题,并且在当今时代,数据的清晰度和可重复性是科学中至关重要的问题。

佛罗里达州坦帕市(2020年8月7日)-尽管经常有新闻宣布“医学突破”,但生物医学和临床科学的进步通常会逐步发生。科学家们利用可以挑战传统思维的新工具和数据,完善了我们对世界运作方式的理解-不断进行修订的过程会引起对旧问题的新答案,并且常常会提出不同的问题。

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在7月15日发表的eNeuro论文中,南佛罗里达大学健康莫桑尼医学院的研究人员描述了他们为寻求新方法回答一个古老问题而创建的一种记者小鼠品系:嘌呤能受体基因P2X2是否在特定的感觉神经细胞群体中表达?


“我们需要一个合适的小鼠模型来可视化P2X2的位置,因此我们可能证明该基因实际上是在非常离散的一组感觉神经中表达的。而且,由于向前发展,我们需要一个允许我们操纵这些迷走性结节的报告系统。神经以精确,多样的方式用于治疗目的。”资深作者Thomas Taylor-Clark博士说,他是分子药理学和生理学系教授。


“本文举例说明了如何用更好的技术重新审视问题会导致人们更加清楚地理解问题,并且在当今时代,数据的清晰度和可重复性是科学中至关重要的问题。”


P2X2受体(简称P2X2)属于P2X离子通道家族,位于细胞膜表面,并被神经递质三磷酸腺苷(ATP)激活。P2X2在感觉过程中起关键作用,包括味觉,听觉,血压调节的某些方面以及感觉内脏器官(如肺和膀胱)的物理刺激。


Taylor-Clark博士研究影响防御行为(包括咳嗽)的气道感觉神经,以及在疾病和伤害中出现错误时会发生什么。为了进一步开展研究,他的团队需要一种更可靠的方法来区分哪些细胞亚群表达P2X2,尤其是在脑和脊髓(中枢神经系统)和周围神经系统(在脑和脊髓外部的神经)中。现有的药理和生化技术选择性不够,产生的基因表达模式差异极大,从而妨碍了对P2X2表达细胞类型的准确估计。


因此,USF Health研究人员创造了一种整合有强大基因方法的敲入小鼠,可用于未来的实验中。他们制造了一只老鼠,该老鼠在表达P2X2基因的细胞中表达细菌酶cre重组酶。该酶操纵DNA中的特定位点(lox序列)。然后,他们将这只P2X2-cre小鼠与第二只具有特定lox序列的小鼠进行了繁殖,这些序列在cre的控制下产生大量的tdTomato(一种明亮的红色荧光蛋白)。在P2X2 cre小鼠和cre敏感性小鼠的后代中,即使P2X2表达水平较低,tdTomato仍能在表达P2X2的细胞中稳定表达并明确报道(可视化)。


Taylor-Clark博士说:“使用该系统,您可以更轻松地查看要调查的任何细胞类型。”“而且,由于许多小鼠品系具有不同的cre敏感基因表达模式,因此您可以使用模块化方法,几乎可以操纵任何基因或遗传过程来测试其在组织/器官功能中的作用。”

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