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模型制备

兔脑血管痉挛模型

2018年11月09日 浏览量: 评论(0) 来源:《人类疾病动物模型复制方法学》 作者:周光兴 责任编辑:yjcadmin

(1)复制方法  新西兰兔,雌雄不拘,体重为2.0~2.5kg。

1)自体血注入  经耳缘静脉注射戊巴比妥钠(按25~30mg/kg体重的剂量)或20%乌拉坦(按5ml/kg体重的剂量)麻醉,左侧卧位固定,剪除手术区域毛发,皮肤消毒。切口垂直于颧弓并经其中点,上达颞上线,下达颧弓下0.5cm,一次切开直达颧骨鳞部,钻孔后扩大成窗,充分显露中颅窝底。剪开硬膜,抬起颚叶,吸除脑脊液,使脑叶塌陷。沿蝶骨大翼探至视神经处,将塑料导管剪成1.5cm长,管端放在视神经外侧。导管另一端固定在颞肌表面。从耳中央动脉抽取3ml自体动脉血(不加抗凝剂),在10s内匀速经导管注入,再缝合皮肤。导管埋于皮下。48h后,仅将皮肤缝线拆除,注血后再将导管取出,清创缝合,庆大霉素2万U/d,连续肌肉注射3d,防止感染。

2)血管造影法  将兔转为仰卧位固定。以锁骨为底边、锁骨中点上1.0cm为顶点,弧形切开皮肤,切除锁骨,找到锁骨下动脉,游离并穿三条引线,远心端靠近耾骨头部结扎耾骨下动脉,其余二条引线仅做第一环而不结扎。动脉近心端靠近胸锁关节处夹闭锁骨下动脉,用眼科剪将动脉剪一小口,将充满肝素的导管置入动脉腔内,结扎第二结。去除动脉夹,再将动脉导管向前推移,使其尖端进入主动脉弓,也可将动脉导管送入相应动脉内,再拉紧第三结,而非结扎。注入60%泛影葡胺5ml后,再将动脉导管尖端缓慢退至第二、三结之间,结扎第三结,拔出导管。重复造影时,仍按上述操作方法进行,锁骨下动脉长约1.5cm,足够三次造影。末次造影后处死动物,行大体解剖及病理组织学检查。

(2)模型特点  病理解剖见脑池、颅底、大脑凸面均有凝血块分布。HE染色可见血管内皮细胞脱失,内弹性层皱缩呈齿轮状。全脑血管造影能清晰显示颈内及椎基动脉系统。按Liszczak法分级(轻度痉挛:收缩在10%~20%;中度痉挛:收缩在20%~30%;重度痉挛:收缩大于30%),血管造影显示48h后脑血管痉挛的发生率达93%,重度达71%,其余为中度。二次注血后6d仍见有88%的脑血管痉挛,重度占64%。

(3)比较医学  经翼点入路置管法,凝血块分布广泛,方法简便易行。由于颞肌下减压,置入管在颞肌表面及颅底处,不会压迫颞叶。此方法避免了枕大池注血法的不足,但主要指标同枕大池注血法。经锁骨下动脉行全脑血管造影,路径明显短于经股动脉造影法,又能直接显露动脉,操作简单迅速。结扎锁骨下动脉,由于侧支循环能维持腋动脉供血,肢体不会出现退行性变。上述方法适合于迟发性脑血管痉挛的亚急性或慢性实验。

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