目的 评估中药复方肾纤康对肾损伤和纤维化的保护作用,并探讨其可能的作用机制。

方法 采用单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)建立慢性肾病( chronic kidney disease,CKD)小鼠模 型,并随机分为假手术组、模型组及肾纤康低、高剂量组(1500、4500 mg / (kg·d)),每组 8 只。 肾纤康各组每天 灌胃不同剂量的肾纤康,其余小鼠灌胃等量的生理盐水,持续 7 d。 实验结束后,收集肾组织,通过苏本素-伊 红(HE)和 Masson 染色评估肾损伤和纤维化。 用 Real-time PCR、免疫组化和 Western Blot 检测纤维化标志物、 上皮膜蛋白 3(epithelial membrane protein 3,Emp3)及 Tgf-β/ Smad 信号通路相关蛋白的表达。 细胞实验中,通 过 Emp3 回复实验和 Co-IP 分析肾纤康对 Emp3 / Tgf-β/ Smad3 通路及其与转化生长因子 β 受体 2( TGF-beta receptor R2,Tgfβ2)相互作用的影响。

结果 肾纤康干预显著改善了 UUO 模型组中的免疫细胞浸润和肾小管 萎缩,降低了肾损伤分子 1(kidney injury molecule 1,Kim1)和脂质运载蛋白 2(lipocalin 2,Lcn2)的表达,验证了 其在减轻肾损伤方面的效果。 Masson 染色及纤维化标志物纤连蛋白( fibronectin,Fn)和 α-平滑肌肌动蛋白 (α-smooth muscle actin,α-SMA)的检测结果显示,肾纤康能有效抑制 UUO 诱导的纤维化进程。 机制研究发 现,肾纤康通过特异性下调 Emp3 / Tgf-β/ Smad3 信号通路的异常活化发挥作用,细胞实验进一步证实了肾纤康 通过调节 Emp3 来影响 Tgf-β/ Smad3 信号传导。 Co-IP 实验结果显示,肾纤康通过调控 Emp3 与 Tgfβ2 的相互 作用来发挥作用。

结论 肾纤康对慢性肾病小鼠模型表现出显著的保护作用,能够有效减轻肾损伤和纤维化。 其机制可能与下调 Emp3/ Tgf-β/ Smad3 信号通路的活化有关,提示肾纤康在肾保护方面具有潜在的治疗价值。

阅读原文：肾纤康调控Emp3╱Tgf-β╱Smad3信号通路改善肾纤维化的研究.pdf