( 五 ) 胚胎的质量鉴定

胚胎的鉴定是指应用各种手段对胚胎质量和活力进行评定或等级分类。生产中常用形态学方法进行胚胎的级别鉴定,就是将体视镜的放大倍数调至 80～100倍,通过观察胚胎的形态、卵裂球大小与均匀度、色泽、细胞密度、与透明带间隙以及细胞变性等情况,将胚胎进行质量分级。在国内,胚胎按质量的高低被分为 A 、 B 、 C 和 D 四级,与国际上的1、2、3和4级相应,具体标准见表5-2-2.正常发育的胚胎,其中卵裂球一般外形整齐清晰,大小一致,分布匀而紧密,发育速度与胚胎日龄相一致。对发育正常的胚胎供移植或体外培养和保存。

表5-2-2  哺乳动物胚胎分级标准

级别                          标准

A 级   胚胎发育阶段与母畜发情时间相吻合;形态完整、外观匀称;卵裂球轮廓清晰,大小均匀,无水泡样卵裂球;结构紧凑,细胞密度大;色调和透明度适中,没有或只有少量游离的变性细胞,变性细胞的比例不超过10% 。

B 级   胚胎发育阶段与母畜发情时间基本吻合;形态完整,轮廓清晰;细胞结合略显松散,密度较大;色调和透明度适中;胚胎边缘突出少量变性细胞或水泡样细胞,变性细胞的比例为10%～20% 。

C 级   发育阶段比正常迟缓1～2d;轮廓不清楚,卵裂球大小不均匀;色泽太明或太暗,细胞密度小;游离细胞的比例达到20%-50%,细胞联结松散;变性细胞的比例为 30%-40% 。

D 级   未受精卵或发育迟缓2d以上,细胞团破碎,变性细胞的比例超过50%,死亡退化的胚胎。

注 :A 和 B 级胚胎可用于鲜胚移植或冷冻保存 ;C 级胚胎只能用于鲜移植 , 不能进行冷冻保存 ;D 级胚胎为不可用胚胎。

  不同发育阶段的早期胚胎以及异常卵的形态参见图5-2-3、图5-2-4。

胚胎质量和活力鉴定除了形态学方法外,还有体外培养法、荧光法(活体染色法)、测定代谢活性和胚胎的细胞计数。