目的 探索新鲜和固定骨骼肌组织的最优冰冻切片方法，为骨骼肌疾病的快速诊断及骨骼肌疾病 发病机制的研究奠定实验基础。

方法 提取 Ｃ５７ＢＬ／ ６Ｊ 小鼠胫骨前肌，新鲜组织经液氮直接速冻、包埋剂联合液氮 速冻、异戊烷联合液氮速冻前处理；固定组织经直接包埋、包埋剂联合液氮速冻进行前处理，制作冰冻切片后 ＨＥ 染 色，并计算冰晶和肌纤维横截面积以评估不同前处理方式的切片效果。

结果 新鲜组织经液氮直接速冻和异戊烷 联合液氮速冻处理后均可见肌纤维束形态消失，大量的冰晶空泡；包埋剂联合液氮漂浮速冻，可见肌纤维束完整致 密、无冰晶，为适合新鲜组织的前处理方法。 固定组织包埋剂联合液氮速冻处理后肌纤维束完整、无冰晶。

结论 新鲜和固定组织经包埋剂联合液氮速冻处理后肌纤维束完整、无冰晶，便于免疫组化、免疫荧光等实验的进一步进 行，有利于准确快速地诊断骨骼肌疾病及探索骨骼肌疾病的发病机制。

阅读原文：骨骼肌组织冰冻切片制备方法优化研究.pdf