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抗菌性碳点修饰PEEK干预MRSA感染环境植入物骨整合性能的体内研究
目的 本研究拟评价抗菌性碳点修饰聚醚醚酮( polyether ether ketone,PEEK)在感染性骨缺损环境 的骨整合性能。
方法 熔融法制备结合透析纯化获得胍基碳点( guanidine⁃based carbon dots,G⁃CDs),应用聚乙烯 醇缩丁醛酯(polyvinyl butyral, PVB)通过浸泡⁃干燥法制备 G⁃CDs 修饰的 PEEK 植入物(PEEK/ PVB⁃G⁃CDs)。 将 SD 大鼠分为:PEEK 植入未感染组(PEEK( -)组),PEEK/ PVB⁃G⁃CDs 植入未感染组(PEEK/ PVB⁃G⁃CDs( -) 组), PEEK 植入感染组(PEEK(+)组),PEEK/ PVB⁃G⁃CDs 植入感染组(PEEK/ PVB⁃G⁃CDs( +)组)。 每组大鼠均于垂直 股骨外侧髁处制备一个直径 2 mm、深度 5 mm 的孔洞以模拟骨缺损。 将 30 μL 生理盐水注入 PEEK( -) 组和 PEEK/ PVB⁃G⁃CDs(-)组大鼠骨缺损的骨髓腔内形成未感染组。 将 30 μL 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin⁃ resistant Staphylococcus aureus,MRSA)菌悬液(1. 5 × 10 4 CFU/ mL)注入 PEEK(+)组和 PEEK/ PVB⁃G⁃CDs(+)组大鼠 骨缺损的骨髓腔内。 植入术后 0、2 和 4 周,应用动物专用 X 射线机照射各组大鼠植入部位。 术后 6 周,Micro⁃CT 评估植入部位的骨组织特征。 骨髓细菌培养、苏木精⁃伊红染色( HE staining)、甲苯胺蓝染色( Toluidine blue staining)、戈德纳三色染色(Goldner trichrome staining)及免疫组化染色分析各组大鼠的骨植入部位。
结果 (1)X 射线、Micro⁃CT、骨髓细菌培养和组织病理学分析等结果确定证实了 PEEK( -)组和 PEEK/ PVB⁃G⁃CDs( -)组未出 现感染与骨缺损整合;PEEK/ PVB⁃G⁃CDs( +) 组发挥抗菌性有效控制 MRSA,菌株形成的骨髓炎实现骨整合,而 PEEK(+)组因持续的感染无法骨整合;(2)免疫组化染色评价明确 PEEK(+)组显示出比其他 3 组更低的白细胞介 素(interleukin,IL)⁃4 和 IL⁃10 等抗炎因子以及更强的 IL⁃6 和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)⁃α 等促炎因 子表达,表明 G⁃CDs 修饰的 PEEK 可抑制 MRSA 感染,调节局部微环境的炎症水平,促进骨缺损部位的骨整合。
结论 抗菌性碳点修饰 PEEK 具备优异的骨整合性能,为今后的临床治疗提供了一种候选策略。
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