目的 制备针对人 SET8 的单克隆抗体,并探索其对肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,同时评 估其在肝癌小鼠模型中的抗肿瘤效果。

方法 通过人 SET8 多肽片段免疫小鼠,筛选并融合 B 细胞与骨髓瘤细胞, 建立稳定分泌 SET8 单抗的杂交瘤细胞株。 通过小鼠腹腔注射、腹水采集的方式生产并纯化。 采用 CCK-8 法、流式 细胞术及 Western blot 技术,分别分析 SET8 单抗对肝癌细胞增殖、凋亡、细胞周期及凋亡相关蛋白表达的影响。 最 后,构建人肝癌细胞移植瘤小鼠模型,体内评估 SET8 单抗对肿瘤生长的抑制作用。

结果 人 SET8 单抗在 50 μg / mL 和 100 μg / mL 浓度下显著抑制 Huh-7 和 Mahlavu 肝癌细胞活力(P<0. 05),且浓度越高抑制效果越强。 流式细 胞术分析显示,相较于空白对照组,SET8 单抗、紫杉醇及二者联合处理均显著提高 Mahlavu 细胞凋亡率,且联合组 效果最佳(P<0. 05)。 同时,SET8 单抗诱导 Mahlavu 细胞周期阻滞于 S 期和 G₂ 期,减少 G₁ 期细胞。 Western blot 分 析显示,该单抗增加凋亡相关蛋白 Bax 和 Caspase-3 的表达(P<0. 05)。 体内实验显示,SET8 单抗单独或联合紫杉 醇均有效抑制肝癌细胞在裸鼠体内的增殖,联合组治疗效果最为显著(P<0. 05)。

结论 制备的人 SET8 单抗有效 抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡,并在动物体内展现出良好的抗肿瘤效果。

阅读原文：靶向人SET8单抗的制备及对肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响.pdf