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模型制备

免疫性不育动物模型

2025年03月31日 浏览量: 评论(0) 来源:《常用医药研究动物模型》 作者:主编 苗明三 朱飞鹏 责任编辑:yjcadmin

1.造模材料  动物:新西兰兔160只,体重约1.5kg。

2.造模方法

(1)新西兰兔精子悬液的制备:取15只新西兰兔雄种兔精液。要求精子活力良好、精子密度>0.3×10的9次方个/m。用PBS洗3次后混合,将精子密度调整到12×10的6次方个/ml,加庆大霉素100u/ml备用。

(2)造模:对需造成精子抗体(AsAb)(+)的兔以1mL/只的剂量每间隔10天进行皮内、皮下多点注射,共10次免疫,需造成(-)的兔及对照同时注射同等剂量的生理盐水。

3.造模后生化变化

(1)AsAb的检测结果:雄雌各半新西兰兔,经100天免疫后,兔血清AsAb呈强阳性。因实验因素,经免疫的雄性兔其精浆AsAb亦呈强(+)。用等剂量生理盐水注射的空白组新西兰兔,经检测AsAb为(-)。

(2)AsAb(+)雄性兔精子超微结构的改变:AsAb(+)雄性兔约60%~70%精子外形呈不同程度异常,表现为顶体结构不完整,双层膜性结构肿胀明显,局部顶体与核间隙增宽,赤道板不清晰、核染色质电子密度不均匀,尾部少数线粒体有融合,微管结构尚正常。AsAb(-)雄性兔约80%精子外形正常,顶体结构完整,双层膜性结构和赤道板清晰,核染色质电子密度均匀,尾部线粒体规则,大小形态较一致。

(3)AsAb(+)雄性兔精子质量的改变:AsAb(+)雄兔精子出现较多头头、头尾凝集,及其他质量的改变。AsAb阴性雄性兔精子密度为(100.0±27.1)×10的6次方个/ml,活率为(54.1±13.6)%,运动速度为(26.6±1.1)μm/s,运动方式直线为主。AsAb阳性雄性兔精子密度为(93.1±30.8)×10的6次方个/ml,活率为(20.6±14.2)%,运动速度为(12.0±6.5)μm/s,运动方式转圈+凝集。

(4)AsAb介导的新西兰兔的不育率、流产率,配对情况及不育率、流产率:AsAb(雄/雌)+/+的不育数为14对,流产数为1对,不育率为56%,流产率为4%;+/-的不育数为12对,流产数为1对,不育率为48%,流产率为4%;-/+的不育数为11对,流产数为0对,不育率为44%,流产率为0%;-/-的不育数为1对,流产数为0对,不育率为20%,流产率为0%。


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