目的 通过高脂饮食诱导 Ｗｉｓｔａｒ⁃ＳＤ 高脂血症易感（ＷＳＨｃ） 大鼠建立非酒精性脂肪性肝病 （ＮＡＦＬＤ）模型，从 Ｓｒｅｂｐ⁃１ 基因揭示该大鼠 ＮＡＦＬＤ 的发病机制。

方法 取 ３０ 只 ６ 周龄的 ＷＳＨｃ 大鼠，高脂饲 喂 ２ 周后，分为高脂对照组、高脂 ＋ ＡＡＶ 空载组、高脂 ＋ ＡＡＶ 组，每组 １０ 只。 高脂 ＋ ＡＡＶ 空载组、高脂 ＋ ＡＡＶ 组分别于门静注射不含病毒的载体和含 ｓｈＲＮＡ（ ｓｈｏｒｔ ｈａｉｒｐｉｎ ＲＮＡ）病毒的载体。 另取 １０ 只同周龄的 ＷＳＨｃ 大鼠饲喂正常饲料作为正常对照组。 每 ２ 周检测血清 ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＢＩＬ、ＡＬＰ、ＴＢＡ、ＧＬＵ、ＣＨＯＬ 和 ＴＧ 水 平。 继续饲喂 ８ 周后处死动物，取肝行苏木素⁃伊红（ＨＥ）、油红“Ｏ”、Ｍａｓｓｏｎ 和天狼星红染色，观察各组大鼠 肝组织形态、脂质沉积和纤维化情况。 利用 ＲＴ⁃ｑＰＣＲ 检测肝 Ｓｒｅｂｐ⁃１、Ａａｃｓ、ＦＡＳＮ、ＬＤＬＲ 等脂质代谢相关基因 的表达；分离培养 ＷＳＨｃ 大鼠肝细胞，分为正常对照组和高脂对照组，ＲＴ⁃ｑＰＣＲ 检测 Ｓｒｅｂｐ⁃１ 基因表达；并构建 Ｓｒｅｂｐ⁃１ 敲除组，检测肝细胞 ＴＧ 含量，油红“Ｏ”染色观察脂肪聚集。

结果 高脂饲喂 １０ 周后，ＷＳＨｃ 大鼠血清 ＡＬＴ（Ｐ ＜ ０. ００１），ＡＬＰ（Ｐ ＜ ０. ００１），ＴＢＡ（Ｐ ＜ ０. ０５），ＧＬＵ（Ｐ ＜ ０. ００１），ＣＨＯＬ（Ｐ ＜ ０. ００１）显著升高，肝脂质 异常沉积形成大泡性脂滴并见纤维化病变，Ｓｒｅｂｐ⁃１ 表达水平显著升高（Ｐ ＜ ０. ００１）；与高脂对照组 ＷＳＨｃ 大鼠 相比，高脂 ＋ ＡＡＶ 组 ＡＬＴ（Ｐ ＜ ０. ０５），ＧＬＵ（Ｐ ＜ ０. ０１）降低，肝脂质沉积情况减轻，视野下未见大泡性脂滴， ＦＡＳＮ（Ｐ ＜ ０. ０５），ＬＤＬＲ（Ｐ ＜ ０. ０１）等基因表达明显升高。 此外，高脂对照组肝细胞的 Ｓｒｅｂｐ⁃１ 表达明显升高 （Ｐ ＜ ０. ００１）；Ｓｒｅｂｐ⁃１ 基因敲除以后，细胞 ＴＧ 降低，且脂滴聚集程度减轻。

结论 ＷＳＨｃ 大鼠 ＮＡＦＬＤ 模型肝 Ｓｒｅｂｐ⁃１ 基因能影响血脂代谢和肝脂质沉积，还能调控肝脂代谢相关基因的表达；体外实验表明，Ｓｒｅｂｐ⁃１ 低表 达可减轻肝细胞脂毒性损伤，这表明 ＷＳＨｃ 大鼠 ＮＡＦＬＤ 形成与 Ｓｒｅｂｐ⁃１ 基因异常高表达密切相关。

阅读原文：Ｓｒｅｂｐ⁃１基因促进ＷＳＨｃ大鼠非酒精性脂肪肝形成.pdf