目的 观察前额皮质环磷酸腺苷效应元件结合蛋白( cyclic-AMP response element binding protein, Creb)干扰和过表达对大鼠抑郁行为的影响。

方法 采用脑立体定位注射造模方法、Western blot、RT-qPCR 和免疫 荧光检测技术筛选出可敲降大鼠前额皮质脑区 Creb 表达的腺相关病毒株( adeno-associated virus,AAV)。 然后将 40 只大鼠随机平均分为正常(Control)组、束缚(CRS)组、束缚干扰(CRS+AAVI)组、束缚过表达(CRS+AAVO)组, 造模期间监测各组大鼠体重和摄食量。 造模结束后采用糖水消耗、高架十字、强迫游泳和旷场对大鼠行为学改变 进行监测; 采用 ELISA 方法测定各组大鼠前额皮质 5 - 羟色胺 ( 5-hydroxytryptamine, 5-HT)、 去甲肾上腺素 (norepinephrine, NE)和皮质酮(corticosterone, CORT)含量。

结果 Western blot 和免疫荧光检测结果均显示,干扰 2(shRNA2)组 Creb 蛋白表达较其他组均显著降低(P<0. 05),RT-qPCR 实验结果显示干扰 2 组 Creb mRNA 表达较 其余 3 组显著降低(P<0. 01),因此选择 AAV-Creb1-shRNA2 病毒株用于后续敲降 Creb 造模。 大鼠经脑立体定位 注射 Creb 敲降和高表达 AAV 后,束缚干扰组大鼠摄食量较其他组自束缚应激第 2 周开始出现显著降低( P< 0. 01),体重增长缓慢,新环境探索欲望和快感下降,绝望和紧张行为明显增加,前额皮质 5-HT、NE 的水平显著降 低(P<0. 01),而 CORT 水平显著升高(P<0. 01)。 而注射 AAV-Creb1 病毒株可在一定程度上逆转以上抑郁样行为 和相关神经递质水平的改变。

结论 前额皮质 Creb 表达降低可加重大鼠的抑郁程度,而其表达升高可在一定程 度上减轻大鼠的抑郁程度,进一步确证前额皮质 Creb 是参与抑郁症发病的重要靶点之一,可为今后抑郁症动物基 因模型构建及发病机制研究提供思路和参考。

阅读原文：前额皮质Creb表达对大鼠抑郁样行为影响的研究.pdf