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大鼠胎儿期肺组织固定方法的探索
目的 基于胎鼠独特的肺组织生理结构和现有的大鼠肺组织固定方法,探索胎鼠肺组织病理学研究所需的 取材与固定方法。
方法 对6只妊娠20.5 d的成年SD大鼠实行剖宫产,获得胎鼠。在每只孕鼠所产胎鼠中选取4只 体重、生命体征与呼吸状态相近的健康存活胎鼠,按照随机数表法随机分为直接取肺浸润组、气管内灌注后取肺浸 润组、胎鼠整体浸润组和气管内灌注后胎鼠整体浸润组。为系统对比分析不同固定方法下肺组织的解剖形态,对4 组胎鼠的肺组织样本进行取材、灌注和固定处理后,观察各组肺组织的大体形态;经过石蜡切片及苏木精-伊红 (hematoxylin-eosin,HE) 染色后,在光学显微镜下观察肺整体、肺泡和肺支气管的组织学形态。
结果 胎鼠直接 取肺浸润组的肺门不清晰、肺组织分叶不明显、形状不规则,肺内空腔小,肺泡与肺支气管皱缩。气管内灌注后取 肺浸润组的肺门清晰,肺组织分叶明显、形状规则,肺内空腔大,肺泡与肺支气管饱满。胎鼠整体浸润组与气管内 灌注后胎鼠整体浸润组均能看到肺脏、心脏和皮肤等器官,肺组织分叶明显、形状不规则,肺叶边缘有破损。其中 胎鼠整体浸润组胎鼠胸廓扁平,肺内空腔小,肺泡与肺支气管皱缩;而气管内灌注后胎鼠整体浸润组胎鼠胸廓饱 满,肺内空腔大,肺泡与肺支气管较饱满。
结论 气管内灌注后取肺浸润法在胎鼠肺组织原始形态还原度及石蜡切 片、染色和组织病理学观察与分析等方面皆优于直接取肺浸润法、胎鼠整体浸润法和气管内灌注后胎鼠整体浸润 法,且该方法中包埋、切片和染色等操作流程简便、耗材节省。因此,对于大鼠胎儿期的肺组织病理学观察,推荐 使用气管内灌注后取肺浸润法进行固定。
阅读原文:大鼠胎儿期肺组织固定方法的探索.pdf
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