大鼠尿毒症模型
1.造模材料 动物:雄性SD大鼠,体重200~250g;药物:麻醉剂,抗生素。
2.造模方法 假手术组切开皮肤,暴露肾脏后牵拉两侧肾包膜,缝合切口。造模组经背切除右肾2/3,1~2周后切除左肾。
3.造模原理 通过切除大鼠肾脏,建立大鼠尿毒症模型。
4.造模后的变化 造模组大鼠切除5/6肾脏后14周,血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)浓度开始升高,血浆二氧化碳水平下降,18周达高峰。术后20周,尿毒症大鼠 MAP显著高于假手术组和空白对照组,而LVSP明显低于假手术组和空白对照组。
超微结构观察:空白和假手术组大鼠心肌细胞有基膜和质膜构成的完整肌膜,肌质中肌原纤维丰富,可见明显的周期性排列的肌节,Z带明显,肌丝排列整齐,肌原纤维间有大量的线粒体、肌质网和糖原颗粒,并见少量脂滴。造模组大鼠自术后16周始,随着肾功能损伤,心肌细胞在电镜下呈局灶变性改变,肌膜增厚卷曲,不规则突起。术后20周可见部分质膜破裂,基膜呈局限性分离,电子密度降低,心肌细胞内线粒体肿胀、空泡化,肌质网扩张,溶酶体增多,并见糖原、脂类物质的聚积,肌原纤维肿胀、稀疏。并出现异常收缩带,带间有线粒体堆积,内有呈丝状结构的Ca2+沉积,形成大小不等的高密度结晶。共聚焦激光扫描显微镜观察可见空白和假手术组心肌细胞细胞质内Ca2+浓度水平较为恒定,而造模组细胞质内Ca2+含量明显增多。在部分严重变性的心肌细胞内,甚至出现肌原纤维裂解,肌丝成分减少,Z带增厚等改变。
细胞酶化学观察:电镜观察:空白和假手术组大鼠心肌细胞内线粒体SDH活性强,反应产物均匀致密,位于线粒体内膜和嵴上。而造模组大鼠术后16周即可见心肌细胞内线粒体SDH反应产物明显减少。经相关分析发现,心肌细胞内线粒体SDH反应产物与血肌酐水平呈显著负相关,而与血浆二氧化碳水平呈显著正相关。术后20周可见部分严重变性的心肌细胞内SDH活性完全丧失。