目的 采用网络药理学、分子对接技术和体内实验，探讨活血通络方 （ Ｈｕｏｘｕｅ Ｔｏｎｇｌｕｏ ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ，ＨＸＴＬＰ）治疗脊髓损伤（ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ ｉｎｊｕｒｙ，ＳＣＩ）的潜在作用机制。

方法 通过中药系统药理学数 据库与分析平台（ＴＣＭＳＰ）检索 ＨＸＴＬＰ 的活性成分，瑞士化合物靶点预测数据库（Ｓｗｉｓｓ ｔａｒｇｅｔ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ）获取 作用靶点，构建“活性成分⁃靶点”网络。 ＳＣＩ 相关靶点通过访问在线人类孟德尔遗传数据库（ＯＭＩＭ）和人类基 因数据库（ＧｅｎｅＣａｒｄｓ）获得。 基于基因与蛋白质相互作用网络分析数据库（ＳＴＲＩＮＧ）建立 ＨＸＴＬＰ 与 ＳＣＩ 共同 靶点的蛋白互作网络（ＰＰＩ）。 Ｍｅｔａｓｃａｐｅ 数据库用于京都基因与基因组百科全书（ＫＥＧＧ）和基因本体（ＧＯ）富 集分析共同靶点，Ａｕｔｏｄｏｃｋ １. ５. ７ 软件进行活性成分与关键靶点的分子对接，Ｐｙｍｏｌ ２. ４. ０ 软件进行结果可视 化。 最后通过动物实验验证 ＨＸＴＬＰ 治疗 ＳＣＩ 的效果。

结果 研究共获得 １８４ 个交集靶点，关键靶点涉及丝 氨酸／ 苏氨酸激酶 １ （ ｓｅｒｉｎｅ ／ ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ １，ＡＫＴ１）、信号传导及转录激活蛋白 ３ （ ｓｉｇｎａｌ ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ３，ＳＴＡＴ３）、热休克蛋白 ９０α 家族 Ａ 类成员 １（ ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎ ９０ ｋＤａ ａｌｐｈａ，ｃｌａｓｓ Ａ ｍｅｍｂｅｒ １，ＨＳＰ９０ＡＡ１）、磷脂酰肌醇 ４，５⁃二磷酸 ３⁃激酶催化亚基⁃α（ ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ⁃４，５⁃ｂｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ ３⁃ ｋｉｎａｓｅ ｃａｔａｌｙｔｉｃ ｓｕｂｕｎｉｔ ａｌｐｈａ，ＰＩＫ３ＣＡ）、磷酸肌醇 ３ 激酶调节亚基 １（ｐｈｏｓｐｈｏｉｎｏｓｉｔｉｄｅ⁃３⁃ｋｉｎａｓｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｓｕｂｕｎｉｔ １，ＰＩＫ３Ｒ１）、ＧＴＰ 酶（ｈａｒｖｅｙ ｒａｓ，ＨＲＡＳ）、雌激素受体 １（ ｅｓｔｒｏｇｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ １，ＥＳＲ１）、丝裂原活化蛋白激酶 １ （ｍｉｔｏｇｅｎ⁃ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ １，ＭＡＰＫ１）、表皮生长因子受体（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＥＧＦＲ）等。 分 子对接结果表明核心活性成分和关键靶点之间具有较高的结合亲和力。 动物实验结果显示，与模型组相比， 活血通络方组小鼠行为学评分升高（Ｐ ＜ ０. ０５），后肢运动功能改善，损伤区域组织学形态更完整。 蛋白免疫 印迹（Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ） 结果显示 ＨＸＴＬＰ 可有效的抑制关键靶点蛋白 ＨＳＰ９０ＡＡ１ 和磷酸化 ＳＴＡＴ３ （ ｐｈｏｓｐｈｏ⁃ ＳＴＡＴ３，Ｐ⁃ＳＴＡＴ３）表达，促进磷酸化磷脂酰肌醇⁃３⁃激酶（ ｐｈｏｓｐｈｏ⁃ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ⁃３⁃ｋｉｎａｓｅ，Ｐ⁃ＰＩ３Ｋ），磷酸化 ＡＫＴ １（ｐｈｏｓｐｈｏ⁃ＡＫＴ１，Ｐ⁃ＡＫＴ１）的表达。

结论 本研究验证了 ＨＸＴＬＰ 有多组成、多靶点、多途径协同作用治 疗 ＳＣＩ 的特点，为 ＳＣＩ 临床用药及进一步研究提供实验理论依据。

阅读原文：基于网络药理和动物实验探讨活血通络方治疗脊髓损伤的作用机制.pdf