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模式小鼠批量鉴定方法的探讨

2025年04月03日 浏览量: 评论(0) 来源:中国比较医学杂志2025年第1期 作者:金悠 倪岚 魏琦 赵欢 何金钢 责任编辑:lascn
摘要:为模式小鼠基因型批量鉴定工作建立高效的 DNA 提取方法。

目的 为模式小鼠基因型批量鉴定工作建立高效的 DNA 提取方法。

方法 以鼠尾组织为实 验材料,采用碱煮简化法、碱煮常规法、蛋白酶 K 裂解法和 DNA 提取试剂盒 4 种方法提取模式小鼠 DNA,测 定 DNA 模板纯度、浓度,评价凝胶电泳图的优劣,并比较 4 种方法所耗时长及实验成本。

结果 蛋白酶 K 裂 解法提取的 DNA 浓度最高,碱煮简化法和常规法次之;试剂盒处理所得的 DNA 纯度较高,碱煮简化法次之。 4 种方法处理所得的 DNA 模板通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增、凝胶电泳后均可得到 清晰的 DNA 目的条带。 此外,碱煮简化法提取的 DNA 模板在-20 ℃ 保存 1 个月后仍可用于基因鉴定,且耗 时最少、成本最低。

结论 模式小鼠批量鉴定基因型时,碱煮简化法是目前最简便、最快捷、最经济的 DNA 模 板提取方法。

阅读原文:模式小鼠批量鉴定方法的探讨.pdf

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