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5⁃Aza⁃CdR通过抑制大鼠原代肾肌成纤维细胞Epo基因启动子高甲基化逆转PMT
2025年04月07日
来源:中国比较医学杂志2025年第1期
作者:袁玲 王蕾 程鹏 江茜 崔晓雪
责任编辑:lascn
摘要:观察去甲基化剂 5-氮杂-2’脱氧胞苷(5⁃aza⁃2’⁃deoxycytidine,5⁃Aza⁃CdR)对大鼠原代 肾肌成纤维细胞的周细胞肌成纤维细胞转化( pericyte⁃myofibroblast transition,PMT)的影响。
目的 观察去甲基化剂 5-氮杂-2’脱氧胞苷(5⁃aza⁃2’⁃deoxycytidine,5⁃Aza⁃CdR)对大鼠原代 肾肌成纤维细胞的周细胞肌成纤维细胞转化( pericyte⁃myofibroblast transition,PMT)的影响。
方法 取 5⁃Aza⁃ CdR 250 ng / mL 处理 大 鼠 原 代 肾 肌 成 纤 维 细 胞 72 h, 采 用 焦 磷 酸 测 序 方 法 检 测 促 红 细 胞 生 成 素 (erythropoietin,EPO)基因启动子甲基化程度,采用免疫荧光与 Western blot 检测 α-平滑肌肌动蛋白( alpha⁃ smooth muscle actin,α⁃SMΑ)、血小板源性生长因子受体 β(platelet⁃derived growth factor receptor β,PDGFRβ)和 DNA 甲基转移酶 3a(DNA methyltransferase 3a,Dnmt3a)的蛋白表达水平,并检测细胞上清液 EPO 水平。
结果 与对照组相比,5⁃Aza⁃CdR 处理能显著降低 Dnmt3a 的表达和 Epo 启动子高甲基化水平,并随之降低了肌成纤 维细胞中 α⁃SMA 的表达及 α⁃SMA 与 PDGFRβ 的表达比例,同时,5⁃Aza⁃CdR 处理提高了细胞上清液中 EPO 的水平。
结论 5⁃Aza⁃CdR 可通过抑制大鼠原代肾肌成纤维细胞 Epo 启动子高甲基化逆转 PMT。
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