目的 研究加味四妙散通过微小 RNA-146a(microRNA-146a, miR-146a) 调控 Toll 样受体 4 (Toll-like receptor 4, TLR4) / 核因子-κB ( nuclear factor-κB, NF-κB) 信号通路对尿酸钠( monosodium urate, MSU)晶体诱导的 RAW264. 7 巨噬细胞炎症模型的影响,探讨其抗炎作用机制。

方法 以 MSU 晶体诱导 RAW264. 7 细胞建立痛风性关节炎模型,分为空白对照组、模型组、加味四妙散组和秋水仙碱组。 CCK-8 法检 测各组细胞活性,酶联免疫吸附法检测白细胞介素( interleukin, IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α( tumor necrosis factor-α, TNF-α)水平,实时荧光定量聚合酶链式反应检测 miR-146a miRNA 和 TLR4、髓样分化因子 88 (myeloid differentiation factor 88, MyD88)、TNF 受体相关因子 6(TNF receptor-associated factor 6, TRAF6)、NF- κB p65 mRNA 表达,Western blot 检测 TLR4、MyD88、TRAF6、磷酸化(phospho, p)-NF-κB p65 蛋白表达。

结果 与空白对照组比较,模型组 miR-146a 表达显著降低(P<0. 01),TLR4、MyD88、TRAF6 的 mRNA 和蛋白表达、pNF-κB p65 蛋白表达以及 IL-1β、IL-6、TNF-α 表达水平均显著升高(P<0. 01);与模型组比较,加味四妙散组和 秋水仙碱组 miR-146a 的表达明显升高(P<0. 01),TLR4、MyD88、TRAF6 的 mRNA 和蛋白表达以及 p-NF-κB 的 蛋白表达均明显降低(P<0. 01),IL-1β、IL-6、TNF-α 水平显著降低(P<0. 05)。

结论 加味四妙散可能通过上 调 miR-146a,抑制 TLR4 / NF-κB 信号通路的激活,减少炎症因子的产生,从而减轻 MSU 晶体诱导的巨噬细胞 炎症反应。

阅读原文：基于miR-146a调控TLR4╱NF-κB信号通路探讨加味四妙散对尿酸钠晶体诱导的RAW2647细胞炎症的作用机制.pdf