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模型制备

房劳法致性腺功能改变肾虚证模型

2025年08月20日 浏览量: 评论(0) 来源:《常用医药研究动物模型》 作者:主编 苗明三 朱飞鹏 责任编辑:yjcadmin

1.造模材料  动物:Wistar种大鼠,雄性,2~3个月龄,体重为200~280g;雌性,体重为140~200g。

2.造模方法

(1)以1%精致美曲膦酯(敌百虫)和1%苯扎溴铵(新洁尔灭)混合液对实验大鼠洗浴灭菌净化,雄性大鼠再以0.5g/只灌胃土霉素,每日1次,连续3天。雌性大鼠每天皮下注射长期避孕针0.2ml/只(庚炔诺酮50mg和戊酸雌二醇5mg),2~3天后,雌鼠即进入动情期,从阴道涂片见有角化细胞证实。将每只雄鼠和5只雌鼠共笼,次日,选出垫盘中有阴道栓的雄性大鼠待用,无栓者将雌鼠随机交换。将3天内有栓的雄性大鼠随机分为对照组交配组。对照组3~4只大鼠共笼,交配组则每笼一雌一雄。每天将雌性大鼠随机交换,3天换一批。换下的雌大鼠休息7~10天再经处理循环使用,每鼠仅使用3~4次。在2支40瓦日光灯照明的14m×14m室内面积饲养,持续12h的光照,12h黑暗,维持室温在18~28℃。如此饲养100天,此间每天检查并记录交配组笼中阴道栓情况。

(2)动物造模:房事不节组:每天每只雄鼠按照1:7的比例与雌鼠同笼,同笼的雌鼠均被灌胃长效避孕药,并证实已进入动情期。每天下午5:00投入动情期雌鼠,第二天早晨取出,下午再投入另一批动情期雌鼠,取材前12h开始每天灌胃0.1ml生理盐水,4天后再每天肌注0.5ml生理盐水,造模12周。

3.造模原理  中医认为,房事不节,损伤精气,房劳过度可致肾虚。雄性大鼠可与一动情期雌鼠交配数次,当出现呆滞疲劳状态时,投入一只新的动情期雌鼠又可兴奋起来进行交配。本模型利用雄性大鼠与雌性大鼠尽量交配,连续数月,可出现肾虚的表现。传统医学认为,肾为“先天之本”,肾阳为全身阳气之源,肾阳虚则五脏六腑生理功能减退,并伴有虚寒肌冷症状。肾阳与生殖生理关系密切,肾阳虚则患者表现出性欲减退、阳痿、早泄及不育不孕。现代医学研究表明,不良情绪、房劳过度、久病体虚等因素可造成患者内分泌系统功能紊乱,体内激素分泌失调或下降,久之导致下丘脑-脑垂体-性腺轴功能异常,最终引起性器官萎缩和性欲下降、阳痿、早泄。

4.造模后一般变化  实验组雄性大鼠白细胞总数和淋巴细胞转化率明显降低,精囊腺重量减轻,血浆睾酮水平降低。雄鼠出现精神萎靡,少动骑跨,毛色干枯乏泽,食量减少的现象。

5.造模后生化变化  正常对照组交配跨骑次数、血清睾酮(ng/ml)分别是8.1±2.18、354.4±92;模型组分别是3.7±1.49、196.4±78.4。从此数据可以看出,房劳过度可导致大鼠血清睾酮显著下降,活性显著降低。

6.注意事项  本模型成功的关键在于完善的饲养条件和有足够数量的高质量的雌性动物。进行交配时要有安静的环境。观察交配试验应在弱光、安静条件下进行;观测条件应一致,各组交替、同时进行,观测者也应各组交替观察,以减少或排除不同观测时间、不同观测者对结果的影响;根据具体情况可以延长观察时间。


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