DNA合成抑制肾虚证模型(肾阳虚)
1.造模材料 动物:昆明种雄性小鼠,体重22~30g;新西兰纯系雄性兔,体重1.3~1.8kg。药物:羟基脲。
2.造模方法 羟基脲给小鼠灌喂,剂量为287.4mg/kg,每天1次,用药期为7~15天(平均11.8天);或给兔灌喂,剂量为500mg/kg,每天1次,用药7~10天。
3.造模原理 有关羟基脲肾虚模型研究已有大量文献报道。羟基脲是一种核苷酸还原酶抑制剂,能明显地抑制核苷酸的代谢,抑制DNA的合成,使蛋白质代谢发生相应的改变,导致一系列的虚损症状。
4.造模后一般变化 造模动物呈现消瘦,弓背,毛枯或脱毛,眼闭,尾巴凉,皮温下降,体重下降,耐冻力下降,死亡率增高等现象。
5.造模后生化变化
(1)肝脏中指标的变化:肝脾DNA合成率下降,DNA中Zn2+含量减低,Cu2+含量增加,Zn2+、Cu2+比值下降。血清T、E2含量减少,尿17-羟皮质类固醇、17-酮皮质类固醇排量减少,血清Mg2+含量减少。
(2)对羟基脲造肾阳虚小鼠的影响:对照组造型前体重(g)、造型后体重(g)、耐冻时间(分)、肝脾DNA合成率(每分cmp/mg)分别是270、33.5、172.5±15.5、11560±1980;阳虚组分别是28.1、27.0、119.5±6.7、5600±848。说明造模成功。
6.造模后病理变化 睾丸重量减轻,白细胞数减少,血清抗体滴度降低,抗体形成细胞数减少。心室收缩力及收缩速率降低,舒张功能明显减弱,快速增加前负荷状况进一步下降。动脉收缩压、舒张压、平均动脉压均有变化,可见补阳药对羟基脲型肾型肾阴虚小鼠有一定治疗作用。
7.注意事项 由于羟基脲不溶于水,配得的为混悬液,故给药时应振摇后再灌服,保证其浓度均匀;DNA提取应严格按步骤操作,离心在4℃的条件下进行。