裸鼠前列腺癌转移模型
【造模机制】由于裸鼠的免疫缺陷,作为人体肿瘤异种移植的受体,移植后生长良好,人类肿瘤在裸鼠移植瘤的形态和功能等特征与移植前基本相同,应用人前列腺癌LNCaP细胞接种裸鼠,鼠间异体移植建立人前列腺癌裸鼠移植瘤模型。
【造模方法】
1.BALB/c雄性裸鼠,鼠龄3~5周,体重18~23g。人前列腺癌LNCaP细胞株。
2.将对数生长期的LNCaP细胞消化后收集,取少量细胞液,调整细胞浓度接近于1×1000000000/ml。乙醚麻醉裸鼠,用1ml注射器吸取200μl的细胞液注射于裸鼠的腋窝处。逐日观察移植部位以了解肿瘤生长的潜伏期和生长速度。待肿瘤长至直径约10mm时,将在皮下已经生长的肿瘤的实体瘤摘除,用手术刀切成两部分,一部分甲醛固定后供作病理检查,另一部分置于平皿内,在F-12培养液中清洗。去除中间坏死部分的组织,同时剔除肿瘤组织周围的肌肉和血管,选取边缘活力旺盛的细胞,再切成约1立方毫米大小的等块,用培养液洗3次,于裸鼠双侧前肢皮下分别置埋植入,进行裸鼠异体移植和传代,无菌条件下继续饲养,待移植瘤长至直径8~10mm时进行实验。
3.模型检测 ①移植瘤生长曲线:细胞接种10天后以及异体移植瘤在移植后第5天定期观察肿瘤生长速度,测量其长(a)、宽(b),然后按公式V=Лab2/6计算肿瘤的体积。②肿瘤组织的病理学检查:将10%甲醛溶液中固定的肿瘤块进行低温石蜡包埋,组织切片后进行常规苏木精-伊红(H&E)染色和免疫组化检查。
【模型特点】将LNCaP细胞接种于裸鼠前肢皮下和瘤块鼠间异体移植、传代,其方法简便,裸鼠移植瘤成功率可达100%。
【模型评估和应用】移植性肿瘤模型的优点在于成功率高,周期较短,肿瘤生长速率一致,个体差异小,宿主生存时间和机体反应相似,易于客观判断等。缺点在于与人体原发肿瘤存在差异,不能完全表现原发肿瘤生物学特性。较适合用于评价药物疗效的筛选和研究前列腺癌转移机制等。