ADIPOQ基因编码的脂联素是一种蛋白质激素，仅由脂肪细胞产生，并通过血液传输到肌肉和肝细胞。脂联素调节与脂肪储存和代谢相关的多种途径，包括调节血糖水平、脂肪酸分解、棕色脂肪细胞分化和糖异生的负调控等。 

赛业生物利用基因编辑技术自主研发构建了Adipoq-iCre小鼠（产品编号：C001529），该模型在小鼠Adipoq基因调控元件的驱动下表达密码子优化后的Cre重组酶（iCre）。iCre重组酶的表达模式与内源基因相似，且内源性Adipoq基因表达不受影响。当Adipoq-iCre小鼠与含有loxP位点的小鼠进行杂交时，其子代小鼠的白色脂肪组织（WAT）和棕色脂肪组织（BAT）中可以发生由Cre重组酶介导的loxP位点间的序列重组。 

图1 白色脂肪和棕色脂肪中tdTomato蛋白表达的免疫荧光（IF）检测 

将Adipoq-iCre小鼠与条件性表达tdTomato荧光蛋白的Rosa26-LSL-tdTomato小鼠交配，取子代的白色脂肪组织（WAT）和棕色脂肪组织（BAT）进行免疫荧光（IF）检测。检测结果显示在Cre+小鼠的脂肪组织中存在大量的tdTomato红色荧光信号。 

图2 骨骼肌、皮肤、肺部、心脏、睾丸和卵巢中tdTomato蛋白表达的免疫荧光（IF）检测 

结果显示，在Cre+小鼠的骨骼肌、皮肤、肺、支气管中检测到部分红色荧光，同时在小鼠的心脏、卵巢周围脂肪、卵巢间质和黄体中存在极少量的荧光信号，而在睾丸中未观察到荧光信号。 

在Adipoq-iCre小鼠（产品编号：C001529）中，Cre重组酶的表达主要集中于白色脂肪组织（WAT）和棕色脂肪组织（BAT）中，组织表达特异性良好。此外，在小鼠骨骼肌、皮肤、肺部和心脏中存在部分重组信号，根据组织学形态结构分析推测该类细胞可能是脂肪细胞。 

(1) 减少背景荧光干扰

由于观测位置和深度不同，激发光和发射光容易被组织吸收，导致高背景和低信噪比，检测灵敏度受限。需要对检测组织进行除毛处理，或使用自发荧光淬灭剂处理样品，选择避开自发荧光峰值波长的荧光蛋白或染料。同时设立对照组，以便快速排除失败原因。 

(2) 确认实验材料

检查并确认荧光抗体、荧光染料等的质量和适用性。 

(3) 确认实验参数

选择合适的波长，例如tdTomato的激发波长为554nm，发射波长为581nm。 

(4) 确认基因型

在实验前使用PCR检测样本的基因型是非常必要的，再使用qPCR或WB等(因样本而异）检测特异性组织的表达情况。