目的 采用蛋白质组学技术研究桦褐孔菌提取物治疗克罗恩病的作用机制。

方法 采用 ２，４，６－三 硝基苯磺酸（ＴＮＢＳ）诱导建立克罗恩病（Ｃｒｏｈｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ， ＣＤ）模型。 ４８ 只 ＳＤ 雄性大鼠，随机分为对照组、模型组、 桦褐孔菌提取物低（２００ ｍｇ ／ ｋｇ）、中（４００ ｍｇ ／ ｋｇ）、高（８００ ｍｇ ／ ｋｇ）剂量组和阳性对照组（美沙拉嗪，２２５ ｍｇ ／ ｋｇ）。 药 物干预 １ 周后，进行疾病活动指数（ＤＡＩ）评分和结肠黏膜损伤指数（ＣＭＤＩ）评分；苏木素－伊红（ＨＥ）染色观察结肠 组织病理变化；ＥＬＩＳＡ 检测大鼠血清中 ＩＬ⁃１β、ＩＬ⁃６ 和 ＴＮＦ⁃α 炎症因子水平。 取对照组、模型组及桦褐孔菌提取物 高剂量组的结肠组织，采用非标记蛋白质组学分析鉴定各组大鼠结肠组织中的蛋白，并对其进行生物信息学分析。 最后采用 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 和 ＲＴ⁃ｑＰＣＲ 对关键蛋白进行验证。

结果 与模型组相比，桦褐孔菌提取物中、高剂量组的 ＤＡＩ、ＣＭＤＩ 及 ＨＥ 染色评分显著降低（Ｐ＜０. ０５ 或 Ｐ＜０. ０１），其血清中炎症因子 ＩＬ⁃１β、ＩＬ⁃６ 和 ＴＮＦ⁃α 的含量也显著 降低（Ｐ＜０. ０５ 或 Ｐ＜０. ０１）。 蛋白质组学显示，桦褐孔菌提取物高剂量组与模型组间有 １９９ 个差异蛋白（ＤＥＰｓ），其 中 ６３ 个 ＤＥＰｓ 与 ＣＤ 相关，生物信息学结果显示 ６３ 个 ＤＥＰｓ 要涉及 ＮＯＤ 样受体信号通路、钙信号通路和坏死性凋 亡等多条通路。 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 和 ＲＴ⁃ｑＰＣＲ 检测各组大鼠结肠组织中 Ｖｄａｃ１ 和 Ｔｒｐｖ２ 的蛋白和 ｍＲＮＡ 水平，与蛋白质 组学结果一致。

结论 桦褐孔菌提取物可能通过干预 Ｖｄａｃ１、Ｔｒｐｖ２ 的表达，调节 ＮＯＤ 样受体信号通路、钙信号通 路和坏死性凋亡，从而达到治疗 ＣＤ 的效果。

阅读原文：基于蛋白质组学技术探讨桦褐孔菌提取物治疗克罗恩病的作用机制.pdf