目的 基于 ＮＯＸ４ ／ ＲＯＳ 信号通路探讨 ＥＦＨＤ２ 影响乳腺癌发生进展的作用机制。

方法 将细胞分 为 ＮＣ⁃ｓｈＲＮＡ 组和 ＥＦＨＤ２⁃ｓｈＲＮＡ 组，构建沉默 ＥＦＨＤ２ 表达的慢病毒载体及其对照载体后转染乳腺癌细胞 ＭＤＡ⁃ ＭＢ⁃２３、ＭＣＦ⁃７，ｑＲＴ⁃ＰＣＲ 验证转染效率；ＣＣＫ８ 检测细胞增殖活性；平板克隆实验检测细胞集落形成能力；划痕实验 检测细胞迁移；Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ 实验检测细胞侵袭；流式细胞术检测细胞凋亡及 ＲＯＳ 水平；ｑＲＴ⁃ＰＣＲ 检测 ＧＬＵＴ１、ＰＤＫ１、 ＰＦＫ１、ＰＫＭ２、ＰＤＨ、ＬＤＨ ｍＲＮＡ 的表达；Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 检测 Ｃｌｅａｖｅｄ ｃａｓｐａｓｅ⁃３、ＭＭＰ⁃２、ＮＯＸ４ 蛋白的表达。

结果 与 ＮＣ⁃ｓｈＲＮＡ 组相比，ＥＦＨＤ２⁃ｓｈＲＮＡ 组细胞中 ＥＦＨＤ２ 的表达明显降低，细胞存活及其集落形成能力减弱；细胞凋亡 率及促凋亡蛋白 Ｃｌｅａｖｅｄ ｃａｓｐａｓｅ⁃３ 的表达升高；细胞迁移距离缩短，细胞侵袭数及促迁移、侵袭蛋白 ＭＭＰ⁃２ 的表达 降低；乳酸及 ＧＬＵＴ１、ＰＤＫ１、ＰＦＫ１、ＰＫＭ２、ＬＤＨ 的水平降低，ＡＴＰ 及 ＰＤＨ 的水平升高；流式结果表明沉默 ＥＦＨＤ２ 后 ＲＯＳ 水平降低，ＮＯＸ４ 蛋白下调。

结论 ＥＦＨＤ２ 可通过调节 ＮＯＸ４ ／ ＲＯＳ 信号通路，抑制 ＲＯＳ 生成，引起乳酸及葡 萄糖堆积从而促进乳腺癌细胞凋亡，抑制细胞增殖、迁移及侵袭。

阅读原文：ＥＦＨＤ２调节ＮＯＸ４／ＲＯＳ通路启动糖代谢重编程促进乳腺癌进展的机制研究.pdf