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急性肺损伤对大鼠脾T细胞凋亡的影响及益肺健脾方的干预作用研究
目的 观察急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠脾 T 细胞凋亡及 X⁃连锁凋亡抑制蛋白相关因子 (XIAP⁃associated factor 1, XAF1)、 肿瘤坏死因子 α ( tumor necrosis factor⁃alpha, TNF⁃α)、 死亡相关因子 ( factor associatedsuicide, FAS)蛋白表达情况,探讨益肺健脾方治疗 ALI 的机制是否与下调 XAF1、FAS、TNF⁃α 蛋白表达, 抑制 T 细胞凋亡有关。
方法 60 只 SPF 级雄性 SD 大鼠,随机分为空白组、模型组、阳性组、益肺健脾方高、中、低 剂量组。 阳性组给予地塞米松每天 0. 5 g / kg 灌胃,益肺健脾方高、中、低剂量组分别给予每天 12、6、3 g / kg 的益肺 健脾方灌胃,模型组与空白组均给予等量蒸馏水灌胃,每天给药 1 次,连续 14 d。 动物肺功能检测系统检测各组大 鼠肺功能情况;观察各组大鼠肺部影像学特征及脏器指数和肺组织湿重/ 干重(W/ D)变化;苏木素⁃伊红(HE)染色 观察各组大鼠肺部组织的病理学变化;流式细胞术检测各组大鼠脾 T 细胞亚群(CD4 + / CD8 + )及脾 T 细胞的凋亡情 况,Western Blot 检测脾中 XAF1、FAS、TNF⁃α 蛋白表达水平。
结果 模型组大鼠肺功能降低,脾和胸腺脏器指数减 少,肺组织湿重/ 干重(W/ D)显著升高(P < 0. 01),肺部组织出现炎性渗出、肺泡破裂等现象,同时伴有肺纹理增粗 以及大片磨玻璃影,T 细胞亚群(CD4 + / CD8 + )显著减少,XAF1、FAS、TNF⁃α 蛋白表达及 T 细胞凋亡率显著升高(P < 0. 01);经益肺健脾方干预后,大鼠肺组织湿重/ 干重(W/ D)明显降低,胸腺的脏器指数显著升高(P < 0. 05,P < 0. 01),T 细胞亚群(CD4 + / CD8 + )明显增加,XAF1、FAS、TNF⁃α 蛋白表达及 T 细胞凋亡率明显下降(P < 0. 05,P < 0. 01)。
结论 ALI 可诱发大鼠脾 XAF1、FAS、TNF⁃α 蛋白表达上调及 T 细胞凋亡,益肺健脾方可能通过下调 XAF1、FAS、TNF⁃α 蛋白表达,抑制 ALI 诱发的脾 T 细胞凋亡。
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