目的 探究三白草酮(Sauchinone,Sch)抑制单侧输尿管结扎( unilateral ureteral obstruction,UUO)小 鼠肾组织纤维化作用及其机制。

方法 取雄性 ICR 小鼠 40 只,分为假手术组( Sham group)、UUO 纤维化模型组 (UUO-Model group)、Sch 低剂量组( Sch-Low group)、Sch 高剂量组( Sch-High group)以及阳性对照组(Val group)。 假手术组仅分离左侧肾输尿管,不结扎。 UUO 纤维化模型组剥离左侧近端输尿管进行双结扎,手术后第 2 天开始, Sch 低剂量组(10 mg / kg)、Sch 高剂量组(30 mg / kg)、阳性对照组(缬沙坦 100 mg / kg)分别每日灌胃 1 次,连续灌胃 给药 4 周。 给药结束后,检测血清中肌酐(serum creatinine,SCr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)以及炎症因子 肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;检测肾组织中超氧化物歧 化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyd,MDA)和活性氧( reactive oxygen species,ROS)含量; 实时荧光定量逆转录 PCR(reverse transcription real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测肾组 织中炎症因子 TNF-α、IL-6 mRNA 水平;采用苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)染色、免疫组化法检测小鼠肾组织病 理变化和胶原沉积以及转化生长因子 β1( transforming growth factor-β1, TGF-β1)、SMAD 家族成员 3( SMAD family member 3,SMAD3)和结缔组织生长因子( connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达情况;蛋白质免疫印记法 (Western Blot)观察肾组织中胶原蛋白Ⅰ型( collagen type Ⅰ,Collagen Ⅰ)、CTGF、SMAD3、核因子 E2 相关因子 2 (nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)蛋白表达。

结果 与 UUO 纤维化模型组比较,Sch 低剂量组和 Sch 高剂量组小鼠血清中 SCr 和 BUN 以及 TNF-α、IL-6 水平显著降低(P < 0. 05 或 P < 0. 01);肾组织中 SOD 活性显著升高且 MDA 和 ROS 含量显 著降低(P < 0. 05 或 P < 0. 01);肾组织中 TNF-α、IL-6 mRNA 的表达显著降低(P < 0. 05 或 P < 0. 01);显微镜观察 肾小管肿胀系膜增生、胶原纤维沉积显著改善;免疫组化显示,肾组织中 TGF-β1、SMAD3 和 CTGF 蛋白表达显著降 低;Western Blot 显示 Collagen Ⅰ、CTGF、SMAD3、NF-κB 蛋白表达显著减少(P < 0. 05 或 P < 0. 01);同时 Nrf2、HO-1 蛋白表达显著升高(P < 0. 05 或 P < 0. 01)。

结论 三白草酮改善肾组织纤维化的作用,其机制可能通过抗炎症、 抗氧化应激作用,调控 TGF-β1 / SMAD3 信号通路的促纤维化蛋白的表达所介导。

阅读原文：三白草酮对UUO小鼠肾组织纤维化的抑制作用及其机制.pdf