丹参绞股蓝茶对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤细胞炎症凋亡保护作用和机制研究
目的 基于沉默信息调节因子 1( silent information regulator 1,SIRT1) / 高迁移率族蛋白 B1( high mobility group protein B1,HMGB1) / 核转录因子⁃κB(nuclear transcription factor⁃κB,NF⁃κB)信号轴探讨丹参绞股蓝茶 对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl 4 )所致小鼠急性肝损伤肝细胞炎症凋亡反应的抑制作用和机制研究。
方法 C57BL/ 6 小鼠随机分为正常组、模型组、白藜芦醇组、丹参绞股蓝茶低、中、高剂量组、阳性药组,连续灌胃给药 14 d。 采用腹腔注射 0. 5% CCl 4 橄榄油溶液(5 mL/ kg)的方法建立小鼠急性肝损伤模型。 生化法检测小鼠血清中 丙氨酸转 移 酶 ( alanine transferase, ALT)、 天 冬 氨 酸 转 移 酶 ( aspartate transferase, AST)、 乳 酸 脱 氢 酶 ( lactate dehydrogenase,LDH)及肝组织羟脯氨酸( hydroxyproline,Hyp)、丙二醛( malonaldehyde,MDA) 和超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase,SOD)水平;酶联免疫吸附法检测血清炎性因子肿瘤坏死因子⁃α( tumor necrosis factor⁃α,TNF⁃ α)、白细胞介素⁃6( interleukin⁃6,IL⁃6) 和白细胞介素⁃1β( interleukin⁃1β,IL⁃1β) 水平;苏木素⁃伊红( HE) 染色和 TUNEL 染色检测肝组织病理形态结构和肝细胞凋亡情况;Western Blot 检测 SIRT1、HMGB1 和 NF⁃κB 蛋白表达。
结果 与正常组比较,模型组小鼠血清 ALT、AST、LDH 水平和肝组织 Hyp 活性显著升高,以及肝组织中 MDA 和 SOD 活性明显降低,血清炎性因子 TNF⁃α、IL⁃6 和 IL⁃1β 水平显著升高(P < 0. 05 或 P < 0. 01),肝组织存在明显的 病理损伤以及肝细胞凋亡情况,肝组织中 SIRT1 蛋白的表达明显降低,HMGB1 和 NF⁃κB 蛋白的表达升高;与模型 组比较,丹参绞股蓝茶高剂量组和白藜芦醇组小鼠血清肝功能指标 ALT、AST、LDH 水平和肝组织 Hyp 活性显著降 低,以及肝组织中 MDA 和 SOD 活性明显增加,血清炎性因子 TNF⁃α、IL⁃6 和 IL⁃1β 水平显著降低,肝组织的病理损 伤以及肝细胞凋亡情况得到明显改善,肝组织中 SIRT1 蛋白表达增加,HMGB1 和 NF⁃κB 蛋白的表达降低(P < 0. 05 或 P < 0. 01)。
结论 丹参绞股蓝茶能有效保护急性肝损伤,其作用机制可能与调控 SIRT1 / HMGB1 / NF⁃κB 信号通路,减轻肝细胞炎性凋亡有关。
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