目的 运用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱质谱 （ultra-high-performance liquid chromatography coupled with quadrupole electrostatic field orbital trap-mass spectrometry，UHPLC-QE-MS） 非靶向代谢组学分 析法探讨不同海拔高原鼠兔肾脏低氧适应性代谢变化的潜在机制。

方法 捕捉青海省果洛藏族自治州玛多县星宿海 地区海拔4 360 m （MD组） 和青海省海北藏族自治州门源地区海拔2 900 m （MY组） 处的高原鼠兔各10只，经麻 醉后采集血清样本，经安死术后采集肾脏样本，分别进行一般生理生化指标测定和代谢组学分析。其中一部分血清 样本用于血液学分析，另一部分用于血气分析，剩余部分检测生化指标。肾组织样本中代谢物提取后，进行 UHPLC-QE-MS分析，运用代谢组学主成分分析 （principal component analysis，PCA） 和正交偏最小二乘判别分 析 （orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA） 方法分析差异代谢物，筛选标准为变量投 影重要度 （variable Importance in the projection，VIP） >1.5 且倍数变化 （fold change，FC） >1.5 或 VIP>1.5 且 FC<1/1.5。利用相关性分析热力图、差异显著性分析火山图、信号通路识别气泡图和矩形图分别分析差异代谢物及 相关信号通路。

结果 MD组高原鼠兔的红细胞计数、葡萄糖、尿素氮、尿酸和同型半胱氨酸含量高于MY组，而 血红蛋白、血细胞比容、肌酐和二氧化碳结合力低于MY组，这表明不同海拔的高原鼠兔血液携氧能力存在明显差 异。经主成分模式识别分析和OPLS-DA置换检验显示，MD组和MY组高原鼠兔肾脏代谢物具有明显的聚类型分布 （R²Y=0.930，Q²=0.655）。按照筛选标准，并经数据库比对发现，不同海拔高原鼠兔的肾脏代谢物差异分子有46 个，其中MD组高原鼠兔的蟾蜍二烯羟酸内酯、腺苷、腺嘌呤、薯蓣皂苷、盐酸小檗碱、鼠尾草酚和虾青素表达水 平均显著升高 （VIP＞1.5，P＜0. 05），花生四烯酸、组胺和香豆素水平显著下降 （VIP＞1.5，P＜0.05）。相关信号 通路分析显示，缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成通路具有最大影响因子 （P＜0.05），而泛酸盐和辅酶A生物合 成通路呈现最显著富集 （P＜0.05）。

结论 不同海拔高原鼠兔肾脏差异代谢物氨基酸、泛酸盐及辅酶A通路可能参 与高原鼠兔高原低氧适应代谢机制。

阅读原文：基于UHPLC-QE-MS的高原鼠兔肾脏差异代谢物及低氧适应机制分析.pdf