目的 利用肝螺杆菌 （Helicobacter hepaticus，H.hepaticus） 致维生素 D 受体 （vitamin D receptor， VDR） 缺陷小鼠肠纤维化，构建炎性肠病模型，初步探究其病理特征及发病机制。

方法 用 2×10⁸CFU 的 H. hepaticus菌液灌胃野生型和VDR^-/-雄性小鼠各5只 （分别命名为WT和VDR^-/-小鼠感染组），隔天1次，连续3次；同 时设立未感染对照组，即野生型和VDR^-/-雄性小鼠各5只，灌胃等体积PBS。最后一次灌胃后第7天检测小鼠感染情 况，确认感染后每周称量1次小鼠体重。于确认感染后第16周时剖检小鼠，采集并测量结肠组织长度，取粪便检测 含水量；将结肠组织分成4份，一份做石蜡切片用于HE、阿尔辛蓝-过碘酸希夫 （alcian blue-periodic acid Schiff， AB-PAS）、Masson 和 免 疫 组 织 化 学 染 色，一 份 提 取 DNA 后 使 用 实 时 荧 光 定 量 PCR （real-time fluorescent  quantitative polymerase chain reaction，RFQ-PCR） 检测H.hepaticus定植水平以判断感染效果，一份提取RNA 后采用反转录PCR （reverse transcription-PCR，RT-PCR） 法检测细胞因子表达情况，另一份提取蛋白后采用蛋白 质印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白 （alpha smooth muscle actin，α-SMA） 和白细胞介素 （interleukin，IL） -33表达 水平。

结果 所有感染组小鼠经灌胃3次后均成功感染H.hepaticus。与VDR^-/-小鼠未感染对照组相比，VDR^-/-小鼠 感染H.hepaticus 16周后体重明显减轻 （P＜0.05），并出现肠道出血情况，粪便含水量显著多于未感染对照组和 WT小鼠感染组 （P＜0.05）。与WT小鼠感染组相比，VDR^-/-小鼠感染组的结肠组织经HE染色显示炎性细胞浸润， AB-PAS染色显示肠腺萎缩不规则、腺泡减少，Masson染色显示胶原面积增多。RT-PCR显示VDR^-/-小鼠感染组的结肠 组织中IL-6、IL-33、肿瘤坏死因子-α （tumor necrosis factor-α，TNF-α） 和α-SMA等炎症及纤维化相关基因的转 录水平比WT小鼠感染组明显升高 （P＜0.000 1）；免疫组织化学法和蛋白质印迹结果显示IL-33和α-SMA蛋白表达水 平也明显增多 （P＜0.001）。

结论 VDR^-/-小鼠感染H.hepaticus后表现为更严重的炎症反应，出现黏膜炎性浸润、 黏膜组织功能受损、胶原沉积等病变，提示炎性肠病模型构建成功。进一步研究发现VDR缺陷可能通过影响IL-33 表达加剧了炎性肠病相关的肠纤维化进程。

阅读原文：肝螺杆菌感染引起VDR-╱-小鼠炎性肠病相关肠纤维化模型的建立及机制探讨.pdf