目的 探究宣肺解毒方抑制 IKK/ NF-κB 信号通路改善多重耐药铜绿假单胞菌(MDR-PA)肺炎大鼠 肺损伤的作用机制。

方法 84 只大鼠随机分为 7 组:对照( control)组、模型(model)组、宣肺解毒方低、中、高剂量 (XFJDF-low/ medium/ high dose)组、亚胺培南西司他丁(IPM)组以及 NF-κB 抑制剂(PDTC)组,每组 12 只。 采用经 口气管插管法建立 MDR-PA 肺炎大鼠模型。 模型构建成功后,宣肺解毒方低、中、高剂量组分别给予相应剂量药物 进行灌胃,亚胺培南西司他丁组给予 IPM 腹腔注射,而对照组和模型组大鼠给予等体积的生理盐水灌胃,每天 2 次,连续 7 d;核因子 κB(NF-κB)抑制剂组在模型构建前 1 h、模型建立后 12 h 和 24 h 给予 PDTC 腹腔注射。 观察 大鼠的行为状态、体重变化、脾和胸腺指数、肺湿重/ 肺干重比例。 通过 HE 染色评估肺组织病理学变化;TUNEL 染 色检测肺组织细胞凋亡;ELISA 检测血清中的白介素 1β( IL-1β)、肿瘤坏死因子-α ( TNF-α)、转化生长因子-β (TGF-β)和白介素 10(IL-10)水平;比色法和硫代巴比妥酸(TBA)法等测定大鼠血清中的还原型谷胱甘肽(GSH) 含量、丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO) 活性和总抗氧化能力( T-AOC);免疫组化法检测肺组织中 NF- κBp65 的表达;RT-qPCR 技术分析肺组织 IKKβ 和 NF-κBp65 mRNA 的表达;Western blot 技术测定肺组织中 IKKβ、 p-IKKβ、NF-κBp65、p-NF-κBp65 蛋白的表达水平。

结果 与对照组相比,模型组大鼠饮食减少、毛发缺少光泽、反 应迟钝、活动度降低、呼吸频率加快,并伴有杂音,体重显著降低(P<0. 01);脾指数和胸腺指数显著升高(P<0. 01); 肺湿重/ 肺干重显著升高(P<0. 01),肺组织肺泡腔分泌物增多、有大量炎性细胞浸润,肺组织凋亡细胞明显增多; 血清中 IL-1β、TNF-α、TGF-β、IL-10 水平显著升高(P<0. 01),MDA 含量增加、MPO 活性增强、GSH 水平与 T-AOC 能 力降低( P< 0. 01);肺组织 IKKβ、NF-κBp65 mRNA 表达量显著升高( P < 0. 01);肺组织 p-IKKβ/ IKKβ 和 p-NF- κBp65 / NF-κBp65 显著升高(P<0. 01)。 与模型组相比,干预组均能不同程度改善上述指标(P<0. 05,P<0. 01),其 中以宣肺解毒方高剂量组和亚胺培南西司他丁组较为显著。

结论 宣肺解毒方可能通过抑制 IKK/ NF-κB 信号通 路改善 MDR-PA 肺炎大鼠肺损伤。

阅读原文：宣肺解毒方抑制IKK╱NF-κB信号通路改善多重耐药铜绿假单胞菌肺炎大鼠肺损伤.pdf