目的 基于 LBP 敲除小鼠(Lbp ^{- / -}小鼠)探讨 LBP 缺失后 Chrm3 在 LPS 诱导的腹腔巨噬细胞 炎症中的作用。

方法 提取 WT 型、Lbp ^{- / -}型小鼠腹腔巨噬细胞,构建 LPS 诱导的腹腔巨噬细胞炎症模型。 分 别采取加入抑制剂 4-damp、转染 siRNA 两种方法抑制 Lbp ^{- / -}小鼠腹腔巨噬细胞中 Chrm3 的表达;通过转染慢 病毒的方法使 Lbp ^{- / -}小鼠腹腔巨噬细胞中的 Chrm3 过表达;抑制剂法将细胞分为对照组 A、LPS 组 A、抑制剂 组,转染 siRNA 法将细胞分为对照组 B、LPS 组 B、si-NC 组、si-Chrm3 组,过表达法将细胞分为对照组 C、LPS 组 C、阴性对照组、过表达组。 本研究以 WT 型、Lbp ^{- / -}型小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象利用 Western blot 方法验 证 Chrm3 在 LPS 刺激下的变化情况,采用 CCK-8、RT-PCR、Western blot 等实验方法探讨 4-damp、si-Chrm3 及过 表达慢病毒对 Lbp ^{- / -}小鼠腹腔巨噬细胞的存活率及炎症的影响。

结果 在 LPS 刺激下 Lbp ^{- / -小}鼠的腹腔巨噬 细胞 Chrm3 蛋白表达显著升高(P<0. 001),而野生型变化并不明显;抑制剂组及 si-Chrm3 组的细胞存活率显 著升高(P<0. 05,P<0. 01)、过表达组细胞存活率显著下降(P< 0. 01);抑制剂组及 si-Chrm3 组的 TNF-α、IL- 1β、IL-6 炎症因子表达情况显著降低(P<0. 01,P<0. 001),与细胞损伤及炎症相关的蛋白 p-ERK 的表达量也 显著降低(P<0. 01,P<0. 001),而过表达组则与之相反,其炎症因子(P<0. 001)和 p-ERK 蛋白的磷酸化水平 显著升高(P<0. 001)。

结论 LPS 刺激 Lbp ^{- / -}小鼠腹腔巨噬细胞后 Chrm3 的表达上调、炎症因子表达上调,使 用 4-damp 与 si-Chrm3 特异性降低 Chrm3 表达后使 LPS 导致的相关的 Lbp ^{- / -}小鼠细胞炎症因子明显下降,使 用过表达慢病毒上调 Chrm3 后使相关炎症因子显著升高。 由此可验证敲除 LBP 后 Chrm3 调控 LPS 诱导的炎 症反应。

阅读原文：Chrm3通过MAPK╱ERK途径调节LPS诱导的Lbp-╱-小鼠腹腔巨噬细胞炎症.pdf