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2019年某实验猴养殖场食蟹猴犬瘟热暴发的诊断
目的 报告2019年某实验猴养殖场中食蟹猴群暴发犬瘟热病毒的诊断情况。
方法 针对2019年底中国华 南地区某实验猴养殖场送检的21只患病食蟹猴 (出现面部红疹、皮屑、流鼻涕和腹泻等症状) 的血清、皮肤红疹拭 子和1只病死猴的抗凝全血、肝、肺、皮肤组织,共46份样品,采用实时荧光定量PCR法检测犬瘟热病毒基因片 段,采用免疫组织化学染色法检测肺组织中犬瘟热病毒核蛋白表达。将病死猴的皮肤组织研磨过筛,取滤液接种于 单层MDCK细胞系中培养分离病毒,将分离的病毒进行全基因组测序鉴定,采用Clustal Omega工具对亚洲不同犬 瘟热病毒分离株进行比对和同源性分析,构建遗传发育树,并对其进行遗传进化分析。
结果 经临床追溯,患病的 食蟹猴出现了与麻疹病毒感染食蟹猴类似的症状,剖检病死猴可见肺部有红色病变,大肠黏膜有明显出血。实时荧 光定量PCR检测患病猴血清、皮肤红疹拭子及病死猴各组织样本中的犬瘟热病毒核酸结果均呈阳性,由标准曲线公 式计算出皮肤组织中的病毒载量最高;免疫组织化学染色病死猴的肺组织显示犬瘟热病毒核蛋白聚集在肺泡上皮细 胞、肺支气管和细支气管处;从病死猴皮肤组织中分离出1株犬瘟热病毒株,遗传进化分析表明其与越南犬中发现 的亚洲1型CDV/dog/HCM/33/140816株亲缘关系最近,基因相似度达到98.86%。
结论 综合临床症状、核酸检测、 病毒蛋白免疫组织化学法及全基因组测序分析结果,诊断该猴场的食蟹猴感染了犬瘟热病毒,建议将犬瘟热病毒纳 为饲养猴群的监测项目之一。本研究还为进一步分析犬瘟热病毒的分子生物学特性提供了基础。
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