目的 探讨结肠炎相关性结肠癌( colitis-associated colon cancer,CAC)小鼠模型不同时间点肠 道病理发展的动态变化特征。

方法 采用偶氮甲烷(AOM) / 葡聚糖硫酸钠(DSS)构建 C57BL / 6 小鼠结肠炎- 癌模型,分别在造模后的第 7、10、14 周 3 个时间点取材,观测小鼠脾指数、结肠长度、质量及结肠单位长度质 量;苏木素-伊红(HE)、Masson 染色观察小鼠结肠病理学变化特征;实时荧光定量逆转录 PCR 法检测不同病 理阶段肿瘤干细胞标记物 CD44 及 Wnt 信号通路 Wnt2b、Lrp5、Axin2、Znrf3 基因表达;多重免疫荧光组化 (mIHC)和细胞免疫荧光(IF)检测成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)、CD44、增殖标记物 Ki67、杯状细胞 MUC2 蛋白表达。 同时,体外分离培养第 10、14 周模型小鼠来源的结肠类器官,观察类器官的 形态及特征标记物变化。

结果 AOM/ DSS 诱导 7 周模型小鼠结肠病理表现为隐窝结构减少、扭曲、分支等变 化,伴随少量胶原纤维沉积,10、14 周模型小鼠结肠呈现不同程度上皮内瘤变,并随着时间延长出现高级别上 皮内瘤变的比例增加,胶原纤维沉积范围增多,伴随结肠长度缩短、肠壁增厚,脾增大等现象。 与正常组相比, 第 14 周模型小鼠结肠 CD44、Wnt2b 表达显著升高(P < 0. 05),Axin2 表达下降(P < 0. 01)。 与第 7 周相比, Wnt2b、Lrp5、Znrf3 表达升高(P < 0. 01、P < 0. 05、P < 0. 01),Axin2 表达下降(P < 0. 01)。 多重免疫荧光组化 染色显示:第 10、14 周模型小鼠结肠 FAP、CD44 表达增多,而 MUC2 表达降低。 其来源的体外类器官呈现囊 球样扩张,尤以 14 周模型来源的类器官更为突出,Ki67 和 CD44 在 14 周模型来源的类器官中表达明显增强。

结论 AOM/ DSS 诱导的小鼠模型在 7、10、14 周可分别呈现结肠慢性炎症、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内 瘤变为主的动态病理改变,病变区域以成纤维细胞激活及上皮细胞异常增殖为特征。

阅读原文：结肠炎相关结肠癌小鼠模型不同阶段病理变化的动态评估.pdf