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模型制备

耗气破气加饥饱失常法脾气虚胃溃疡模型

2025年07月29日 浏览量: 评论(0) 来源:《常用医药研究动物模型》 作者:主编 苗明三 朱飞鹏 责任编辑:yjcadmin

1.造模材料  动物:Wistar大鼠,体重为170~190g,雄性;豚鼠,体重为300~400g;药物:醋酸,戊巴比妥钠,厚朴三物汤。

2.造模方法

(1)脾虚证造模时间为30天。取厚朴、大黄、枳实以3:3:2比例制成100%煎剂。每只大鼠每2天4ml灌胃,同时隔日喂饲料,在第10天进行胃溃疡造模。动物禁食24h后,戊巴比妥钠腹腔麻醉,在剑突下作一2cm纵向切开,暴露胃前壁,在胃窦近胃体处浆膜下注射20%醋酸0.05mL/只,注射完毕按压针孔,还纳胃体,缝合腹壁,常规抗感染3天。

(2)选取体重为300~400g健康豚鼠,每天1次,连续3天灌服20%番泻叶浸汁(1.5ml/100g),禁食不禁水,末次给番泻叶浸汁12小时后,用0.5%肥皂水灌肠,20分钟后由肛门注入5%冰醋酸0.2ml,继续灌服番泻叶2天。

(3)用耗气破气加饮食失节法建立大鼠脾气虚模型。造型后第10天用醋酸法建立大鼠胃溃疡模型,对照组用等量生理盐水代替冰醋酸模拟胃溃疡手术。

3.造模原理  传统医学认为,“饥不得食,脾气已伤,中气必不太足矣”,所以饥饿是导致脾虚的一个重要原因,几乎所有的脾虚造模方法都与饥饿直接相关,而消化能力改善是消除脾虚症状的一个重要因素,中医认为饮食失节、饥饱无度和过食肥甘能损伤脾胃。

采用破气苦降加饮食失节法,过劳加饮食失节法,劳倦加饥饿型大鼠脾虚模型。其理论是“脾虚忌下、降泄、破气”(《本草经疏》),“劳则气耗”(《素问·举痛论》),“形体劳倦则脾病”及“饮食失节、寒温不适,则脾虚乃伤”,“劳倦伤脾”(《素问·本病论》),“形体劳役则脾病,病脾则怠惰嗜卧,四肢不收,大便泄泻”。

食醋法制备脾胃虚寒动物模型,首先是结合了中医关于虚证形成的理论,在造模时间上更充分。而过食酸味可致脾虚的理论早在《黄帝内经》中就有论述。《素问·生气通天论》日:“味过于酸,肝气以津,脾气乃绝”,认为饮食过酸,肝木旺盛,克伐脾土,可致脾气虚衰;《素问·刺法论》关于“欲令脾实,食勿太酸”的训诫也表明了饮食偏酸有损伤脾胃的可能。

4.造模后一般变化  造模动物除了出现溃疡病理变化外,还有明显可见纳呆、消瘦、毛枯、畏寒、蜷卧、腹泻、脱肛、体温降低、耐寒力差、拱背、自由活动度明显减少、痛阈升高、眼睑下垂、毛发疏松等症状。

5.造模后病理变化

(1)胃的病理变化:胃壁各层受破坏,形成穿透性溃疡,从正常位至溃疡边缘,黏膜固行腺从底部起逐渐消失,被覆上层逐渐向下延伸成腺样结构,并呈单层向溃疡面生长。胃粘连指数降低。

(2)胃黏膜分泌生长抑素(SST)和白介素-2(IL-2)的免疫组织化学观察及图像分析:光镜下,SST的阳性细胞可见于胃窦部的幽门腺、胃底、胃体的胃底腺。阳性免疫反应产物呈棕黄色颗粒,分布于胞质内,胞核不着色。与盐水组第4天比较,第4天脾虚组与脾溃疡组D细胞内SST免疫阳性反应增强;与盐水组第14天比较,第14天脾虚组与脾溃疡组免疫反应均增强。图像分析采用平均灰度值测定阳性细胞免疫反应产物的含量。平均灰度值与免疫反应产物的含量成反比。


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