近日，分子演化领域权威期刊 Molecular Biology and Evolution 在线发表了题为“Isoform Evolution in Primates Through Independent Combination of Alternative RNA Processing Events”的研究工作。北京大学分子医学研究所李川昀研究员担任通讯作者，张仕坚博士、王晨曲博士担任共同第一作者，武汉生物技术研究院付爱思作为共同作者给予了大量支持。该项工作运用 PacBio 测序技术对人、猴转录组进行了系统研究，首次在全基因组、全长转录本尺度发现 RNA 可变调控事件之间的组合满足随机搭配。在此基础上，研究发现大量之前未被报道的全新 mRNA，以及众多在人、猴之间存在明显结构差异的 mRNA，为认识转录组复杂性、揭示物种差异的分子基础提供了新视角。

在真核生物中，基因通过转录形成 mRNA 并执行生物学功能，在这个过程中，有些基因区段通过剪接等方式被去除，最终保留在 mRNA 中的部分被称为外显子，被去除的部分被称为内含子。然而，实际情况中，有些区段被保留或是去除，存在一定概率，因此被称为可变调控事件。传统的二代测序技术可以对每个可变调控事件的频率进行精确定量，但由于读长较短，难以从整体水平研究发生在同一个 mRNA 分子上多个可变事件之间的搭配关系。这就好比从北京开往上海的列车，对于某个站点，不同车次是否停靠存在差异；传统的方法可以对每个站点停靠列车的比例进行监控，但若想看一辆列车全程停留站点的情况，就需要一套全程监控系统，分别追踪每一辆列车全程的停靠情况。

灵长类 mRNA 形成的“老虎机模型”示意图

PacBio 技术恰好提供了这样一套系统，用于在全长转录本水平研究可变调控事件之间的搭配关系。本项工作充分利用 PacBio 测序单分子、长读长的优势，在人、猴中准确鉴定得到五万多例可变调控事件，并发现这些可变事件在单个 mRNA 分子上的组合满足随机搭配，这种随机搭配被该课题组称为灵长类 mRNA 形成的“老虎机模型”。正是由于这些可变事件通过随机组合模式形成 mRNA，导致目前领域内对灵长类转录组复杂性的认识严重低估：一方面，本研究发现高达 80% 的人类基因存在未被报道的新 mRNA 形式，而 1119 例新发现的 mRNA 是其编码基因的主要转录产物；另一方面，通过人、猴比较基因组学研究，发现即使在亲缘关系如此接近的两个物种中，众多 mRNA 存在明显的种间结构差异。进一步的群体遗传学研究表明，这些新发现的 mRNA 和物种特异性的 mRNA 受到明显的自然选择约束，提示它们已经具备了生物学功能。

论文的通讯作者李川昀博士认为，这项工作对单基因的功能研究同样具有提示作用：一方面，现有数据库中注释的 mRNA 可能不是该基因主要的转录形式；另一方面，从模式生物中得到的结论在进行转化医学推广时要格外小心，因为模式动物虽然编码与人类类似的基因，但二者的转录产物可能具有完全不同的结构。

本项研究受到国家 973 项目、国家优秀青年科学基金等经费支持。

文章链接：http://pkunews.pku.edu.cn/xxfz/2017-07/28/content_298753.htm