目的 分析 Ｌｉｅｂｅｒ⁃ＤｅＣａｒｌｉ 酒精性肝损伤小鼠模型的转录组学特点。

方法 雄性 Ｃ５７ＢＬ ／ ６Ｊ 小 鼠 １８ 只，随机分成酒精饲料组 １０ 只和对照组 ８ 只。 酒精饲料组喂养 Ｌｉｅｂｅｒ⁃ＤｅＣａｒｌｉ 酒精饲料，先以 １０ ～ ５７. ３ ｍＬ ／ Ｌ 递增量的 ９５％酒精饲料适应性喂养 １ 周，再以 ５７. ３ ｍＬ ／ Ｌ ９５％酒精饲料喂养 ２ 周，共 ３ 周；对照组同时 喂养对照饲料。 处死小鼠留取血清和肝组织，试剂盒检测血清谷丙转氨酶（ＡＬＴ）、谷草转氨酶（ＡＳＴ）与肝组 织总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）、总超氧化物歧化酶（Ｔ⁃ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）含量； ＥＬＩＳＡ 法测定小鼠肝组织炎症因子白细胞介素⁃６（ＩＬ⁃６）、肿瘤坏死因子⁃α（ＴＮＦ⁃α）和转化生长因子⁃β１（ＴＧＦ⁃ β１）水平，并用 ｑＲＴ⁃ＰＣＲ 验证 ＩＬ⁃６、ＴＮＦ⁃α、ＴＧＦ⁃β１ 基因表达。 苏木素⁃伊红（ＨＥ）、油红 Ｏ 染色观察肝组织病 理变化；通过免疫组织化学染色法，使用 Ｆ４ ／ ８０ 抗体检测巨噬细胞的表达变化。 ＲＮＡ⁃ｓｅｑ 分析两组肝组织差 异基因并进行 ＧＯ 和 ＫＥＧＧ 分析，再以 ｑＲＴ⁃ＰＣＲ 验证差异基因表达。

结果 与对照组比较，酒精饲料组小鼠 体质量显著下降（Ｐ ＜ ０. ０１）；血清 ＡＬＴ、ＡＳＴ 水平显著升高（Ｐ ＜ ０. ０１），肝组织 ＴＣ、ＴＧ、ＭＤＡ 水平显著升高（Ｐ ＜ ０. ０５），ＧＳＨ、Ｔ⁃ＳＯＤ 含量显著下降（Ｐ ＜ ０. ０５）；组织中炎症因子 ＩＬ⁃６，ＴＮＦ⁃α 与 ＴＧＦ⁃β１ 水平上升，以 ｑＲＴ⁃ ＰＣＲ 验证结果相一致（Ｐ ＜ ０. ０５）。 肝小叶结构破坏，呈现大泡脂肪变性、微泡性脂肪变性及气球样变性；肝组 织中脂滴显著增多，巨噬细胞表达增加。 以 |ｌｏｇ_２ ＦＣ | ＞ １ 且 ｑ ＜ ０. ０５ 为筛选条件，获得 ２０６３ 个差异基因， 其中 １２３６ 个基因上调，８２７ 个基因下调。 主要在细胞色素 Ｐ４５０ 对外源性物质的代谢、细胞因子与细胞因子 受体的相互作用、趋化因子信号通路、类固醇激素生物合成、谷胱甘肽代谢、视黄醇代谢等通路富集（ Ｐ ＜ ０. ０５）。 ｑＲＴ⁃ＰＣＲ 验证其中显著上调（Ｍｍｐ１２、Ｇｓｔｍ３、Ｃｙｐ２ａ２２ 等）与下调（Ｓｅｒｐｉｎａ１ｅ、Ａｃｍｓｄ、Ｍｕｐ３ｄ 等）的差异 基因各 １０ 个，与转录组测序结果一致。

结论 酒精性肝损伤主要病理机制涉及细胞色素 Ｐ４５０ 对外源性物质 的代谢、细胞因子与细胞因子受体的相互作用、趋化因子信号通路、谷胱甘肽代谢、视黄醇代谢等通路。

阅读原文：Ｌｉｅｂｅｒ⁃ＤｅＣａｒｌｉ酒精性肝损伤小鼠模型的转录组学分析.pdf