甲状腺切除法致肾虚证模型(肾阴虚)
1.造模材料 动物:Wistar种大鼠,雌性或雄性,体重100~230g;杂种或新西兰种白兔,雌性或雄性,体重为1.7~2.7kg;白色豚鼠,雄性,体重350~640g。
2.造模方法
(1)双侧甲状腺全切术。术后30~48天(平均38.8天,大鼠)或8~50天(平均21.1天,兔)或95~99天(豚鼠)。
(2)甲状腺切除组:将动物以1%戊巴比妥钠1ml/100g体重,腹腔麻醉后,切开皮肤,剥离肌肉,仔细分离双侧甲状腺并切除,缝合肌肉、皮肤,术后10天,各鼠腹腔注射生理盐水1ml/10g体重,每周二次,共三周。
3.造模原理 神经内分泌系统通过自主神经系统及下丘脑.垂体一腺体轴释放多种神经递质和激素进而调节机体免疫功能,肾上腺皮质激素(ACS)对免疫功能的效应已被公认为神经免疫调节的重要介质,其神经通路可简化为神经信息通过下丘脑-垂体轴,释放 ACTH,促进肾上腺释放ACS,作用于免疫细胞,产生免疫效应。甲状腺是内分泌腺,具有重要的生理功能,使甲状旁腺生理功能低下,形成肾阴虚模型。
4.造模后一般变化 实验动物出现食欲降低,嗜睡,蜷缩,竖毛,毛无光泽,舌质淡或紫清,体温下降,呼吸频率减慢等现象。
5.造模后生化变化 正常组总T3(μg/L)、总T4(μg/L)、促甲状腺激素(TSH)(MIU/L)分别为0.45±0.14、45.47±14.47、2.55±1.04;模型组分别为0.31±0.07、24.41±10.37、3.59±1.15。甲状腺切除组动物总T3、总T4值显著地低于正常对照组,TSH有升高趋势,说明造模成功。
6.造模后病理变化
(1)造模后心、肺、肾等的变化:下丘脑神经元变性,垂体重量增加。性周期消失,子宫内膜上皮细胞体积增大,胞浆变空,间质水肿。心率下降,心脏扩张,心肌间质水肿,心肌纤维变性,心包内有积液。肺呈重度局灶性间质性肺炎,肝细胞变性坏死,肝细胞线粒体减少,形态改变。肾脏间质多有灶性炎细胞浸润,肾小管上皮细胞变矮,近曲小管上皮细胞萎缩,外膜增厚,胞浆内出现空泡。胃黏膜下层水肿,脑M受体最大结合容易减少,对依他尼酸所致内耳损害抵抗力下降,微音器电位、听神经电位降低,听毛细胞 SHD活性降低。
(2)光镜观察结果提示:正常对照组与假手术组动物心脏、肺基本正常,心肌纤维横纹清楚,肺无瘀血。甲状腺切除组个别动物心肌纤维颗粒变性,多数动物肺泡壁毛细血管瘀血。
7.注意事项 严格控制实验室的温度,手术操作最好由一人来完成,在伤口的缝合中防止炎症。