目的 N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚基 2B(NR2B)及其磷酸化参与大脑缺血/ 低氧神经损 伤。 低氧预适应(hypoxic preconditioning, HPC)作为一种内源性保护干预措施,可以保护大脑免受缺血/ 低氧损伤。 本研究拟通过体内和体外实验研究 HPC 对海马细胞中 NR2B 及其两个酪氨酸位点(1252 和 1336)磷酸化的影响, 探讨其在 HPC 神经保护中的作用。

方法 6 ~ 8 周龄雄性 SPF 级 ICR 小鼠和小鼠海马神经元细胞系 HT22 重复暴 露于低氧环境复制 HPC 动物模型和细胞模型。 免疫蛋白印迹和免疫荧光检测 HPC 小鼠海马和 HT22 细胞中 NR2B 的水平及其酪氨酸 1336 ( pY1336NR2B) 和 1252 ( pY1252NR2B) 的磷酸化水平。 通过免疫蛋白印迹分析 NR2B、pY1336NR2B 和 pY1252NR2B 在突触部位(TxP)和突触旁部位(TxS)中的分布,同时检测指示细胞凋亡的 cleaved caspase-3 和 α-spectrin 的水平。

结果 HPC 下调小鼠海马和 HT22 细胞中 NR2B 和 pY1336NR2B 的水平。 小鼠海马突触旁部位(TxS)中 NR2B 和 pY1336NR2B 水平的变化与海马和 HT22 细胞中的变化相似,而突触部位 (TxP)中的变化则表现出相反的趋势。

结论 NR2B 和 pY1336NR2B 的下调可能参与了 HPC 诱导的神经保护作 用,它们在突触和突触旁的定位可能在神经保护中发挥不同的作用。

阅读原文：低氧预适应对HT22细胞和小鼠海马突触和突触旁中NR2B及其酪氨酸1336的磷酸化的影响.pdf