五指山猪MHCⅡ类分子基因鉴定与分析
目的 获得五指山猪主要组织相容性复合体 (major histocompatibility complex,MHC) Ⅱ类分子基因序 列,并分析其遗传信息,探究五指山猪MHC的生物学功能。
方法 采集3头成年雄性五指山猪的脾脏样本,根据 MHC Ⅱ类分子基因序列设计引物,采用RT-PCR法扩增五指山猪MHC Ⅱ类分子基因的编码序列,通过Sanger测序 确定MHC Ⅱ类分子基因序列,利用生物信息学软件分析五指山猪MHC Ⅱ类分子基因的理化性质、系统进化关系、 保守基序和结构域,以及染色体位置和共线性关系。
结果 共鉴定出8个五指山猪MHC Ⅱ类分子基因,分别为 SLA-DRA、SLA-DQA、SLA-DQB、SLA-DRB、SLA-DOB、SLA-DMB、SLA-DMA 和 SLA-DOA。Sanger 测序后确 定 MHC Ⅱ类分子基因序列,并将序列上传至 GenBank 获得登录号,分别为 PQ182796、PQ182797、PQ182798、 PQ182799、PQ182800、PQ182801、PQ182802和PQ164779。系统进化树分析表明,五指山猪6个MHCⅡ类分子 基因与杜洛克猪、梅山猪、大白猪和巴马猪等不同品种猪的MHC Ⅱ类分子基因不在同一个分支上。生物信息学分 析表明,MHC Ⅱ类分子大部分为疏水性蛋白,其相对分子质量为27 700 ~ 30 000,归于同一亚区的基因含有相似 的保守基序,其中SLA-DQB、SLA-DRB、SLA-DOB和SLA-DMB基因编码的4个MHC Ⅱ类分子包含MHC Ⅱβ保守 结构域,SLA-DRA、SLA-DQA、SLA-DMA和SLA-DOA基因编码的4个MHC Ⅱ类分子包含MHC Ⅱɑ保守结构域。 8个MHC Ⅱ类分子基因散在分布于五指山猪的7号染色体长臂上,与人的3个基因之间具有共线性关系,而与杜洛 克猪的5个基因之间呈现共线性关系。
结论 五指山猪的MHC Ⅱ类分子基因可能具有特殊的遗传学起源。
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