目的 探讨活体探头式激光共聚焦成像 （probe-based confocal laser endomicroscopy，pCLE） 技术在快 速检测与评估小鼠消化道组织形态特征中的应用价值。

方法 将12只6周龄的SPF级雄性昆明小鼠随机分为两组， 其中6只使用乙醇体积分数为52%的红星牌二锅头白酒进行灌胃造模，另外6只使用生理盐水灌胃作为对照。连续 灌胃28 d后，每组随机选取3只，经3%异氟烷吸入深度麻醉后颈椎脱臼处死，即刻剖取胃、十二指肠、空肠和直 肠组织，浸入1%荧光素钠溶液染色，采用pCLE技术观察各组织黏膜表面的微观结构。剩余模型组和对照组小鼠经 3%异氟烷吸入深度麻醉后，先后使用生理盐水、4%多聚甲醛溶液进行心脏灌流，剪取胃、十二指肠、空肠及直肠 各组织进行脱水、切片和苏木精-伊红 （hematoxylin-eosin，HE） 染色，于光学显微镜下观察各节段组织的形态学 变化。

结果 pCLE观察显示，对照组小鼠消化道黏膜组织表面荧光染色均匀，胃小凹、肠绒毛及肠隐窝形状完整， 排列紧密，边缘结构清晰；而模型组小鼠消化道黏膜发生肿胀和变形，并伴有荧光染色不均匀和荧光素渗漏的现 象。此外，部分组织出现缺损或细胞脱落，相邻特征结构 （如胃小凹、肠隐窝） 之间的边界模糊。HE染色观察显 示，对照组小鼠消化道组织结构正常，细胞排列整齐、无缺损，黏膜下腺体大小一致且无增生性改变，无明显炎性 细胞浸润；而模型组小鼠部分消化道组织结构缺损，细胞排列紊乱稀疏，黏膜下腺体萎缩，并伴有明显的炎性细胞 浸润。pCLE观察结果与HE染色的组织学特征一致。

结论 pCLE能够实现对消化道黏膜结构特征的快速、实时、 大范围、高分辨率显微成像，并且能更真实、全面地展示其生理及微观结构特征，该技术在小动物消化系统损伤的 组织学评估研究中显示出良好的应用前景和实际应用价值。

阅读原文：探头式激光共聚焦成像技术用于小鼠消化道组织形态特征分析.pdf